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想配置浓度为50mg/ml的利福平母液用于摇农杆菌（按1:1000加入），参考网上的方法：称取2.5gRif于50ml管中，加40ml甲醇定容至50ml，可以涡旋，加入NaOH助溶。想问的是：1、2.5g利福平是很大的量，进口的一小瓶也就1点多克，需要两小瓶（按比例缩小用量先不说，网上既然说的是2.5g就说明有人这么做过） 2、加甲醇后定容是用水么？ 3、涡旋有什么条件要求么？ 4、 加了2M NaOH 后是继续涡旋还是采取什么方法，因为溶解的并不好，在抽滤灭菌时发现大部分利福平都沉淀不溶 5、抽滤灭菌时大概过滤多少就需要更换滤膜，做了几次都是会弄一身红点，是场灾难。 用这种方法配的利福平加入LB里颜色变化并不明显，而且摇到理想浓度时溶液颜色并不是橙色，就像是被大肠污染了那种黄色。配个利福平就遇到诸多困难，望大家赐教，拜谢 |
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2楼2015-01-05 16:06:01
Esther_Young
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