| 查看: 587 | 回复: 3 | ||
guyue900905新虫 (初入文坛)
|
[求助]
我想体外大量表达某一基因以获得大量目的物质，不知道该怎么做呀～～～ 已有2人参与
|
|
我自己现在有点思路，从乳酸菌里提出DNA,进行PCR扩增，然后跑胶进行胶回收，转到大肠杆菌感受态细胞中，筛选出阳性克隆，之后该怎么做那？对阳性克隆进行培养？之后的代谢产物中怎么筛出我想要的目的物质那？ 还是说我这么个思路就是不对的。求教高手指点一二，自己很糊涂，谢谢您啦！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA在一般情况下主要以什么形式存在？
已经有3人回复
- 什么实验可以验证一个蛋白对dna的nicking作用
已经有12人回复
- CDE共性问题解答解答20120725
已经有26人回复
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-12-24 11:13:20
董博士
金虫 (正式写手)
- 应助: 155 (高中生)
- 金币: 3129.1
- 红花: 24
- 帖子: 312
- 在线: 96.2小时
- 虫号: 3524307
- 注册: 2014-11-07
- 专业: 医学图像数据处理与分析
【答案】应助回帖
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-07 16:47:42
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-07 16:47:42
| 你的目的就是获得目的蛋白是吧，你之前的思路是对的，首先PCR获得目的基因，将其构建到原核载体中,载体可以是HIS标签的PET系列表达质粒载体或GST标签的PGEX系列表达质粒载体，筛选出阳性克隆后，将阳性质粒转入用于表达的感受态中，注意培养基中要加IPTG诱导剂诱导目的蛋白大量表达，然后就可以用相应的柱子纯化了 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
guyue900905
3楼2014-12-28 14:51:00
guyue900905
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 10.5
- 散金: 1
- 帖子: 44
- 在线: 12.8小时
- 虫号: 1876988
- 注册: 2012-07-03
- 专业: 食品科学基础
4楼2015-01-06 09:47:57