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金虫 (小有名气)

[求助] 关于如何规避聚苯乙烯荧光微球吸附蛋白的问题已有1人参与

0.2um的聚苯乙烯荧光微球通过EDC催化交联抗体后，再经过一系列终止反应等完成标记过程。最后2-8度保存发现稀释后的微球存在明显吸附蛋白的情况。通过调节稀释液pH，离子强度，蛋白浓度等方法都无法规避蛋白吸附问题，期待各位虫友支招，谢谢！

1楼 2014-12-22 15:00:34

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金虫 (小有名气)

谢谢搜集的相关资料，大部分我自己也看过，帮助不太大。一般大家标记抗体都是用的化学交联，貌似没几个人提及聚苯乙烯微球本身有吸附蛋白的问题。就是不知道为什么聚苯乙烯荧光微球标记抗体大家都用化学交联而不用吸附的方法，不知道有木有虫友做过吸附标记的实验，两者有啥区别。期待更多虫友交流经验。

2楼2014-12-23 10:57:15

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银虫 (小有名气)

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王雨云: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2015-01-26 13:16:31

聚苯乙烯微球表面虽然有亲水的羧基，用于共价交联蛋白，表面没有羧基的部分所占面积更大，这部分通过疏水作用很容易吸附蛋白。这也是为什么需要blocker来封闭的原因。欢迎邮件交流huxuhua@dukechina.com

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

3楼2015-01-20 08:27:37

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