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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS PAGE胶中跑出的蛋白亚基怎么纯化？
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zlimba

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS PAGE胶中跑出的蛋白亚基怎么纯化？ 已有5人参与

1，因为想测蛋白质亚基的序列
2，网上有前辈说转膜法，可以吗？具体怎么操作的啊？
3，求前辈指点迷津，需要什么试剂，什么工具，还有哪里需要注意的？
4，我实验室SDSPAGE只有小板子，所以胶也小，也薄。
5，问的有点多了，但是希望大家能帮帮我，谢谢

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1楼 2014-12-11 08:52:29
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zlimba

新虫 (初入文坛)
我看文献的方法说的都是大概，我就是希望详细的操作和总体需要什么工具。

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2楼2014-12-11 08:54:27
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zlimba

新虫 (初入文坛)
对了，我只是需要其中的一条亚基，是要切下来吗？

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3楼2014-12-11 09:01:57
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lietomepls

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个叫回收，不叫纯化，以前我们实验室有人做过，你可以用透明胶带把制胶的数字给粘起来，形成一大一下两个孔，小孔加marker，大孔加你的蛋白，这样就增加上样量了，切胶以后把胶捣碎，后面加什么溶液溶胶我也不记得了，我们的蛋白只是用来做免疫，而且是因为重组蛋白是以包涵体的形式表达的所以不得不采取这种方式。对你的试验不一定适用，仅供参考
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4楼2014-12-11 09:36:05
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七夕小巫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测序列又不用纯化出来， 跑的胶很难把蛋白再完整提出来。
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5楼2014-12-11 15:43:28
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
http://www.dxy.cn/bbs/topic/4836097?ppg=8
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6楼2014-12-11 16:20:10
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lpw106

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白和亚基分别有多大的分子量？可以考虑下分子筛
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7楼2014-12-11 16:38:40
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tautou2012

铜虫 (小有名气)
这个叫回收，有试剂盒的。

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天然蛋白纯化
8楼2014-12-11 19:47:02
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果是测序的话，直接挖取亚基的条带送去测序就可以了啊！
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9楼2014-12-14 21:48:27
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