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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 载体构建
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xzy0425

新虫 (初入文坛)

[求助] 载体构建 已有4人参与

请问虫友们，在构建重组载体时，拿到原始环状质粒，除了要看酶切位点，还要考虑什么问题？请具体说说，谢谢！！！！！！！！！！！！！！跪求
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1楼 2014-12-02 19:04:55
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云
引用回帖:
6楼: Originally posted by xzy0425 at 2014-12-03 19:00:20
很多书上给的质粒图谱除了质粒名称、质粒大小、抗性编码区、一些表示位置的数字外，就差不多就剩酶切位点分布了，我不知道该怎么做？不知道下一步到底该先做什么，该如何完成实验？跪求详细说明啊: ...

身边找一个会的学长，让好好给你带带；
基础理论清楚了，事情会变的简单起来；
自己也多看看资料多想想，没做过的事，总会显得很难，做着做着也就没什么了；
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锤之千古
8楼2014-12-03 20:29:33
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xzy0425: 金币+1, ★有帮助 2014-12-04 19:25:15
看是否有标签，结合你的实验目的看需要如何设计实验

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-12-02 19:23:06
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coolkid2001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xzy0425: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-04 19:25:44
载体抗性。
另外，像pcDNA3.1这种真核表达载体，如果基因起始位置满足kozak序列规则，蛋白翻译效率会显著提高。
每个载体都有其说明书的，建议楼主仔细阅读。
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一入江湖岁月催
3楼2014-12-02 21:46:05
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wushm388

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xzy0425: 金币+1, ★有帮助 2014-12-04 19:26:01
质粒图，最好有目的基因序列。用之前双酶切实验检验，然后就可以进行后续实验了。
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4楼2014-12-03 14:26:59
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