24小时热门版块排行榜    

查看: 945  |  回复: 7

wlh太阳花

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求组,纯菌和PCR方面的问题,希望大家进来帮我分析分析,万分感谢 已有3人参与

我养的是细菌,涂板是单菌落,PCR用的引物是27f、1492r,PCR照胶只有目的条带,一点杂带也没有,可是PCR产物测序回来,1492r测序成功,27f测序结果是杂合,我送了几个样,几乎都是这样,这是什么原因,我想知道,涂板是单菌落能证明我的菌是纯菌吗?  我挑单菌落  菌不长,所以我每次都只能用菌保里的菌养。我也不知道我这个菌挑菌为什么不长。。。小女子真是一点办法都没有啦,麻烦各位亲 帮帮我吧
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多划几次单克隆,直到得到单菌落。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-11-30 19:20:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlh太阳花

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-11-30 19:20:58
多划几次单克隆,直到得到单菌落。

涂板一直是单菌落  划线也是单菌落
3楼2014-11-30 20:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wlh太阳花 at 2014-11-30 20:59:14
涂板一直是单菌落  划线也是单菌落...

在单菌落的基础上多次划单菌落,优化pcr体系。一般细菌只有一个16s,不太会出现这种情况。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-11-30 21:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingquan

铜虫 (正式写手)

你仔细看涂片电镜,有时候,个别视野看着是单个菌,但是整个片子是否也是。确定是纯菌了。PCR产物最好回收后连接载体送去测序。这样用通用引物从载体开始测,直接产物开始的碱基峰会很乱的。
5楼2014-12-02 12:11:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lnf117

铁杆木虫 (正式写手)

用的聚合酶换挟

[ 发自小木虫客户端 ]
恶心自己,服务别人
6楼2014-12-02 21:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看菌落是否纯有这几种办法:形态学上观察,镜检,测序是其中一种,你说27F测序有问题,1492R没问题,那可能是公司的问题。
当然16S这个在有些类群中是有两种的
7楼2014-12-03 08:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开小猫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主你是送的PCR产物么?我们都是转到DH5α,然后送克隆子,那样会比较准。我也送过PCR产物,经常测不出来。
8楼2014-12-05 14:16:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wlh太阳花 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:46 by zhouxuan..
[考研] 收08调剂生 +6 komorebi69 2026-03-18 6/300 2026-03-24 19:09 by 汪!?!
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 考研化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 8/400 2026-03-23 18:39 by macy2011
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见