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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 热启动酶很容易失活吗
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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 热启动酶很容易失活吗 已有1人参与

NEB的Q5热启动酶，第一次用的时候效率很高，为什么分装后，第二次用，效率不太好呢
热启动酶冻融一次后，活性会降低的很快吗？
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1楼 2014-11-28 22:15:29
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-02-20 22:25:25
热启动TAQ酶经过修饰，一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露，才会产生聚合作用，这样就能有效避免低温下的模板错配，避免二聚体和非特异扩增，因而热启动TAQ酶对扩增的特异性非常重要，目前我们实验室用的较好的就是ABI,BIODAI和QIAGEM，整体效果上还是不错的。
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2楼2019-02-20 13:32:41
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该不会，正如楼上所说，热启动TAQ酶经过修饰，一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露，才会产生聚合作用，这样就能有效避免低温下的模板错配，避免二聚体和非特异扩增，因而热启动TAQ酶对扩增的特异性非常重要，但目前国内能生产性能较好的热启动TAQ酶的公司并不多，用的较多的主要有QIAGEN、ABI、BIOG等。
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3楼2019-03-28 10:27:17
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