| 查看: 2179 | 回复: 2 | |||
[求助]
问下大家这个跑胶图最下面的条带是二聚体吗？怎么除不掉 已有1人参与
|
|
这两幅图分别是昨天和今天做的细菌菌落的目的基因pcr，共有5个基因，片段长均在100-200bp。引物在设计的时候基本都是选择的没有二聚体的。 第一幅图是昨天做的结果，1μl 浓度为10μM的引物，分别用了60-58-52依次降低的退火温度，退火时间55s。上样量5μl。发现下面有亮的宽带，今天就重复做了一次。 今天引物用了10μM的引物0.2、0.5、1μl三个浓度，60-55-50依次降低的退火温度，退火时间30s。上样量2.5μl，还是有最下面的亮的宽带。 另外今天多挑了一些菌，增大了模板量，昨天的结果感觉已经有拖尾了应该就是模板量太大的原因吧。菌是直接挑的没有煮沸。 想问下大家最下面宽的亮的带是二聚体么，这个可以避免么，还是所有pcr产物的跑胶结果都会有这个带。 因为这个是想给q-pcr设计的引物，所以不知道这个东西有没有影响。  2014-11-26.jpg  2014-11-27.png |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有231人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酵母基因组DNA中的RNA怎么去除不掉？
已经有10人回复
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16528
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 41
- 帖子: 14453
- 在线: 2171.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
2楼2014-11-28 09:17:14
3楼2014-11-28 11:06:16