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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 新手不太会用，见谅
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新虫 (初入文坛)

[交流] 新手不太会用，见谅 已有4人参与

一个基因长度为781bp但将第339个碱基的A突变为C该如何设计？
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1楼 2014-11-27 08:34:15
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-27 19:51:41
突变一般是因为遇到LoopTm值太高，或者引物自身搭链太严重时。突变时，注意只改变碱基，不要改变其对应的氨基酸。计算Tm值时，突变位点以前的序列不要算进去。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-11-27 09:02:07
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枫林123

新虫 (初入文坛)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-27 19:51:54
你是要做定点突变吗？你的基因是连接在载体上的吗？你可以将突变位点设计在引物上
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3楼2014-11-27 10:39:56
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蓝索道人

木虫 (正式写手)
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-27 19:52:05
常用的两种吧：一种是你把目的片段连接到载体上然后设计引物，定点突变，这个全式金有个试剂盒的说明书写的挺详细你可以按照说明书自己设计引物，酶用高保真的；另外一种就是你只有目的片段还没有连接到载体上，用搭桥PCR的方法，设计两对引物分别PCR，最后搭桥。
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努力就有收获！
4楼2014-11-27 14:28:48
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
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设计三条引物就能做到啦

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5楼2014-11-27 14:56:30
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