4楼: Originally posted by 天地一微尘 at 2014-11-29 14:39:14
实际操作以后再说吧。很多时候用软件设计出来的不见得能扩增出来。我前段时间就遇到过这种情况，设计好了引物，各个条件都好，用软件模拟扩增也能扩出来，但实际中就是得不到目的条带。摸索了各种条件，再换了好几对 ...

6楼: Originally posted by peng~yu at 2014-11-30 01:17:51
另外补充一点，由我做实验的经验来看，什么引物二聚体，自身互补啥的，基本上对反应结果没啥影响（只要不是多重就没事），主要就看两个引物退火温度差不多（3度之内吧）就好啦～楼主加油！！

3楼: Originally posted by soarrow at 2014-11-29 01:12:02
上个截图，第一对引物去掉酶切位点以后粗略看了一眼


未标题-1 拷贝.gif
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2楼: Originally posted by soarrow at 2014-11-29 01:09:54
看了一下第一对引物，二聚体的概率不小--即使去除了酶切位点。把酶切位点加上之后，二聚体更多了。
上下游引物进行blast以后，与假丝酵母Candida utilis匹配度挺好，但是也与毕赤酵母Pichia jadinii strain CCTCC  ...

7楼: Originally posted by ccandcc at 2014-11-30 11:06:26
对头 我们试验室也是这个风气，简单高效，
实在不行多弄两个引物，效率最重要...