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小谢子

新虫 (小有名气)

[求助] 求助!多谢各位前辈了! 已有2人参与

怎样才能说明药物通过作用于NF-kB信号通路而起到作用呢?有些文献的“结果说,药物抑制了NF-kBp65的磷酸化,抑制了NF-kB的活性及转录等等,这样可以吗?还是必须要做到有对IkB的作用才能说明啊?单说抑制NF-kBp65磷酸化,影响了NF-kB活性及转录,这样能说明是对NF-kB通路的作用吗?
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陈大橘cp

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 格桑梅朵lwy at 2019-08-24 20:47:58
你好!请问IkB α磷酸化你做的是哪个位点的?搜索抗体,发现有Ser 32、Ser36、Ser32/36三种,不知道买哪种合适?     万分感激呐!!!

请问您确定了吗?我也在纠结这个

发自小木虫IOS客户端
4楼2020-06-30 11:51:13
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查看全部 4 个回答

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

要证明药物通过作用于NF-kB信号通路发挥作用,可以做的实验有很多,如果要全面的话周期会很长:
1. 核质分离后进行蛋白检测:P-IkB,IkB,p65
2. 双荧光素酶报告基因实验检测NF-kB信号通路活性的变化
3.EMSA实验检测p65与DNA结合能力的变化
4. 免疫荧光实验检测p65核质定位的变化
5.Real-time PCR检测特定的NF-kB信号通路下游靶基因mRNA水平的变化
这些都可以说明NF-kB信号通路发生变化,如果是要发文章,具体要看影响因子高低了,当然做的越全面越好,如果只是简单的验证的话,每一条都可以的,只是可能不够严谨和完整
祝实验顺利哈~
医学&统计学
2楼2014-11-29 16:32:32
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格桑梅朵lwy

新虫 (小有名气)

你好!请问IkB α磷酸化你做的是哪个位点的?搜索抗体,发现有Ser 32、Ser36、Ser32/36三种,不知道买哪种合适?     万分感激呐!!!
3楼2019-08-24 20:47:58
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