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新虫 (小有名气)

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[求助] 求助！多谢各位前辈了！已有2人参与

怎样才能说明药物通过作用于NF-kB信号通路而起到作用呢？有些文献的“结果说，药物抑制了NF-kBp65的磷酸化，抑制了NF-kB的活性及转录等等，这样可以吗？还是必须要做到有对IkB的作用才能说明啊？单说抑制NF-kBp65磷酸化，影响了NF-kB活性及转录，这样能说明是对NF-kB通路的作用吗？

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1楼2014-11-25 20:56:40

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董博士

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【答案】应助回帖

要证明药物通过作用于NF-kB信号通路发挥作用，可以做的实验有很多，如果要全面的话周期会很长：
1. 核质分离后进行蛋白检测：P-IkB，IkB，p65
2. 双荧光素酶报告基因实验检测NF-kB信号通路活性的变化
3.EMSA实验检测p65与DNA结合能力的变化
4. 免疫荧光实验检测p65核质定位的变化
5.Real-time PCR检测特定的NF-kB信号通路下游靶基因mRNA水平的变化
这些都可以说明NF-kB信号通路发生变化，如果是要发文章，具体要看影响因子高低了，当然做的越全面越好，如果只是简单的验证的话，每一条都可以的，只是可能不够严谨和完整
祝实验顺利哈~