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小谢子

新虫 (小有名气)

[求助] 求助！多谢各位前辈了！ 已有2人参与

怎样才能说明药物通过作用于NF-kB信号通路而起到作用呢？有些文献的“结果说，药物抑制了NF-kBp65的磷酸化，抑制了NF-kB的活性及转录等等，这样可以吗？还是必须要做到有对IkB的作用才能说明啊？单说抑制NF-kBp65磷酸化，影响了NF-kB活性及转录，这样能说明是对NF-kB通路的作用吗？
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1楼 2014-11-25 20:56:40
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

要证明药物通过作用于NF-kB信号通路发挥作用，可以做的实验有很多，如果要全面的话周期会很长：
1. 核质分离后进行蛋白检测：P-IkB，IkB，p65
2. 双荧光素酶报告基因实验检测NF-kB信号通路活性的变化
3.EMSA实验检测p65与DNA结合能力的变化
4. 免疫荧光实验检测p65核质定位的变化
5.Real-time PCR检测特定的NF-kB信号通路下游靶基因mRNA水平的变化
这些都可以说明NF-kB信号通路发生变化，如果是要发文章，具体要看影响因子高低了，当然做的越全面越好，如果只是简单的验证的话，每一条都可以的，只是可能不够严谨和完整
祝实验顺利哈~
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医学&统计学
2楼2014-11-29 16:32:32
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格桑梅朵lwy

新虫 (小有名气)
你好！请问IkB α磷酸化你做的是哪个位点的？搜索抗体，发现有Ser 32、Ser36、Ser32/36三种，不知道买哪种合适？     万分感激呐！！！
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3楼2019-08-24 20:47:58
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陈大橘cp

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 格桑梅朵lwy at 2019-08-24 20:47:58
你好！请问IkB α磷酸化你做的是哪个位点的？搜索抗体，发现有Ser 32、Ser36、Ser32/36三种，不知道买哪种合适？     万分感激呐！！！

请问您确定了吗？我也在纠结这个

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4楼2020-06-30 11:51:13
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