24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 543  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zzlei

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 已有2人参与

BL21菌株,0.4mM IPTG, 30度诱导五个小时,水溶性蛋白,表达量还算高,但过完镍柱洗脱跑电泳时,发现杂蛋白也很多。本以为是洗脱的问题,但尝试了好多次还是洗不干净。是不是表达出了问题?应该怎么改进? 希望各位支招
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主,你好,最近也在做这方面的,想咨询一下,你是直接去上清过柱子纯化吗?沉淀用PBS溶解,破碎,离心取上清可以过柱子吗?
踏实
4楼2014-11-27 11:52:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

灰血动物

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问是不是用咪唑洗脱的 ,洗脱前有没有优化过它的浓度?
未完成
2楼2014-11-26 11:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzlei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-11-26 11:58:59
请问是不是用咪唑洗脱的 ,洗脱前有没有优化过它的浓度?

嗯,用咪唑洗的,浓度优化好的,但是杂蛋白分不开,跑胶如图。
蛋白表达
MediaLib_Camera Roll_WP_20141124_001.jpg

3楼2014-11-26 16:45:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzlei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-27 11:52:39
楼主,你好,最近也在做这方面的,想咨询一下,你是直接去上清过柱子纯化吗?沉淀用PBS溶解,破碎,离心取上清可以过柱子吗?

溶解,破碎,离心,取上清液过柱子。我做的水溶性蛋白
5楼2014-11-27 12:00:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 277跪求调剂 +6 1915668 2026-03-27 10/500 2026-03-29 16:03 by 王亮_大连医科大
[考研] 297求调剂 +11 田洪有 2026-03-26 11/550 2026-03-29 13:14 by peike
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +9 大馋小子 2026-03-28 9/450 2026-03-28 14:56 by 神马都不懂
[考研] 求化学调剂 +4 wulanna 2026-03-28 4/200 2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
请填处理意见