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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 菌种活化问题
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山还在那儿

银虫 (小有名气)

[求助] 菌种活化问题 已有2人参与

甘油保藏的含有转化质粒的大肠杆菌为什么要先活化？活化的原理是什么？本人急用，一定要37度液体培养基先活化12h时，然后在接种诱导蛋白表达么？

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1楼 2014-11-25 17:15:39
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
保藏的菌会丢失质粒，一般活化都需要重新划单克隆的。

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2楼2014-11-26 08:55:20
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-11-26 08:55:20
保藏的菌会丢失质粒，一般活化都需要重新划单克隆的。

我是直接接在液体培养基里活化的，不过只活化了5小时，就加iptg诱导了，最后蛋白没表达，所以怀疑是不是活化的问题，但后来活化12小时，还没表达，应该是菌种的问题

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3楼2014-12-01 09:22:02
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云忠听雨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

甘油保藏的菌株要使用是需要活化复壮的，如果出现蛋白未表达，可能是菌株不纯，可以平板分离了看看
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4楼2014-12-01 13:59:08
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