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小敏1990110

新虫 (小有名气)

[求助] 在大肠杆菌里表达酶,形成了包涵体,结果酶没有活性,求大神指教!!已有1人参与

用的pet32a载体加入的tag标签,酶已经纯化的比较好了,复性的时候透析MES缓冲液里,可是就是没有活性,不知道问题出在了哪里?
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simengsmile

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-27 19:58:46
超声波破碎,离心,然后建议把离心后的沉淀重悬与娃哈哈水,然后上清,重悬液,以及粗酶液一起跑电泳试试,可能酶活在沉淀中(也就是形成包涵体,再设计方法除去包涵体)
7楼2014-11-27 11:14:20
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lpzl

木虫 (正式写手)

同求啊。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-11-25 10:05:34
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蠹鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小敏1990110: 金币+20 2014-11-26 20:38:02
粗酶液有活性吗?
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
3楼2014-11-26 20:21:31
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小敏1990110

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蠹鱼 at 2014-11-26 20:21:31
粗酶液有活性吗?

没有试过,不过是用的尿素溶解的包涵体,还没有复性,应该是没有的吧,现在感觉是出在复性上面
爱生活,爱自己。
4楼2014-11-26 20:37:45
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