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xlx906047684

金虫 (著名写手)

[求助] 引物设计 已有7人参与

导师按照文献给我设计了两对引物,但PCR的结果和文献完全不一样,文献上得到的是1100bp左右的条带,我得到得的是300bp左右的条带,而且提DNA和PCR都重复做了,结果一样,导师说要重新设计引物,但我不知道怎么在NCBI上找到该物种中发现的所有这个基因相关序列,也不知道该怎么设计引物,本人是跨专业做分子,所以好多东西还不太懂,希望大家能帮帮忙
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xlx906047684: 金币+2, 有帮助 2014-11-25 20:52:13
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenxiangkai at 2014-11-25 08:30:50
引物设计其实很简单,就是要你基因的两端,5-3端,我们只要把5端的20个左右就可以了,当然,需要的时候可以加些酶切位点,保护碱基之类的,很简单的。主要我做的是做普通的那种

5'端就是个定位定点作用,关键是3‘端的设计好吗?
4楼2014-11-25 09:59:43
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zhenxiangkai

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xlx906047684: 金币+2, 有帮助 2014-11-25 20:33:08
引物设计其实很简单,就是要你基因的两端,5-3端,我们只要把5端的20个左右就可以了,当然,需要的时候可以加些酶切位点,保护碱基之类的,很简单的。主要我做的是做普通的那种
2楼2014-11-25 08:30:50
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意萧02

木虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-11-25 13:11:02
就说说而已,怎么帮,序列都没有,跟没说一样
3楼2014-11-25 09:57:59
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zhenxiangkai

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-11-25 09:59:43
5'端就是个定位定点作用,关键是3‘端的设计好吗?...

你自己看看哦 你要怎么设计?
5楼2014-11-25 12:17:59
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