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准博士金虫 (正式写手)
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[求助]
请教萃取内标法！
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According to the manuscript, the authors have analyzed the products of their bioconversion experiments after liquid-liquid extraction with ethyl acetate. However, there is no indication of the usage of an internal standard (such as progesterone, for example). According to my experience, this is a serious flaw. Typically, there is a significant variation in extraction efficiency from sample to sample, even if there is no change in the composition of the biotransformation media. This effect was neglected by the authors. 以上是审稿人提的意见。我先描述一下我的实验：我做得是微生物转化甾体化合物，转化结束，采用乙酸乙酯萃取，然后旋光仪蒸干，接着用乙腈溶解，上液相，分析最终产物、底物和副产物。本身觉得应该没有问题，但因为分离提取没系统研究过，审稿人的建议看不懂。请高人解释。 |
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【答案】应助回帖
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准博士: 金币+20, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2015-01-02 19:35:08
准博士: 金币+20, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2015-01-02 19:35:08
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大概了解审稿人的想法，他的意思是指即使你的biotransformation media都是一样的话(assume转化的结果都相同)，但是每一批样品间在经过液液萃取后，其萃取效率都会有差别(there is a significant variation in extraction efficiency from sample to sample)，造成你最后上液相后得到的产物与副产物会有一点差距，这是因为实验条件变异造成的误差，故应在萃取前加入内标物，即使萃曲效率有些微变化，但分析物与内标物变化的比例是相同的，萃取造成的变异才会降到最低。 請參考看看。 |
2楼2014-11-21 16:53:38