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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 关于显色液系统
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小灯泡

金虫 (小有名气)

[交流] 关于显色液系统 已有4人参与

配好的显色液  加入TMB后为何会有沉淀析出，如何解决呢？还有如何让显色后的蓝色变为紫色？有懂行的么？
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新的旅程新的开始
1楼 2014-11-18 16:19:23
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我用磷酸氢二钠 柠檬酸 无水乙醇 双氧水配的 没出现沉淀 但是颜色偏深
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Life needs passion and imagination and most important , action!!!
2楼2014-11-20 20:02:22
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klistine2010

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
底物缓冲液:十二水磷酸氢二钠1.84g，构橼酸0.51g,加水溶解，并稀释到100ml。
TMB溶液:称取TMB10mg,加无水乙醇5ml溶解混勻。

TMB显色系统:取TMB溶液0.5ml，0.75%双氧水32ul，加底物缓冲液10ml，临用配制。
我用的这个没沉淀。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2014-11-21 09:55:10
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小灯泡

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 疯狂的bamboo at 2014-11-20 20:02:22
我用磷酸氢二钠 柠檬酸 无水乙醇 双氧水配的 没出现沉淀 但是颜色偏深

谢谢，这是双组份的，我想配单组分的
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新的旅程新的开始
4楼2015-03-05 09:32:57
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小灯泡

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by klistine2010 at 2014-11-21 09:55:10
底物缓冲液:十二水磷酸氢二钠1.84g，构橼酸0.51g,加水溶解，并稀释到100ml。
TMB溶液:称取TMB10mg,加无水乙醇5ml溶解混勻。

TMB显色系统:取TMB溶液0.5ml，0.75%双氧水32ul，加底物缓冲液10ml，临用配制。
我用 ...

谢谢，不过我配的是不需要AB液的单组份系统
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新的旅程新的开始
5楼2015-03-05 09:33:54
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biolighter

新虫 (初入文坛)
★
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1.析出是因为添加了过多的TMB  2.如果是实验室使用，建议购买一些，单组份的研发周期比较长。
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6楼2015-04-21 17:30:19
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蒸蛋国籍

新虫 (初入文坛)
★
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1.析出沉淀应该是TMB含量太高，双组份中TMB  0.5mg/ml左右都会有白色沉淀
2.TMB显色为蓝色，蓝色为四甲基联苯醌。要变成紫色，需更换显色剂或酶，使其吸收波长在400-435nm之间
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7楼2015-05-06 15:41:43
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