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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 大片段核酸杂交效率的疑问
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kmuqx59

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段核酸杂交效率的疑问 已有1人参与

本人要进行一个基因组的核酸杂交实验。目标是在利用特异性的200bp探针在基因组中杂交到一个几十KB-100kb以上的片段。请教一下有核酸杂交经验的大神，在进行这种大片段的核酸杂交时，实际操作的效率如何? 操作中相对于普通片段的杂交又需要注意些什么呢？是采用液相效率高还是固相效率高？采用多种探针同时对该区域进行杂交，是否效率更高？或者有没有什么成熟的解决方案呢？
答案详细满意的话，另有答谢。
如果还能提供其他参考资料，那将非常感谢。
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1楼 2014-11-18 11:58:23
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shuangyin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kmuqx59: 金币+10, ★有帮助, 谢谢 2014-12-11 19:08:37
既然要杂交100kb以上的片段就不能用常规方法提DNA了，一般方法提的gDNA长度都只有几十kb。要在低熔点胶里提取以及酶切，以保证片段长度。另外这么长的片段就不要转膜了，电泳完直接在胶里面杂交
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2楼2014-12-05 16:18:44
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