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kmuqx59

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段核酸杂交效率的疑问 已有1人参与

本人要进行一个基因组的核酸杂交实验。目标是在利用特异性的200bp探针在基因组中杂交到一个几十KB-100kb以上的片段。请教一下有核酸杂交经验的大神,在进行这种大片段的核酸杂交时,实际操作的效率如何? 操作中相对于普通片段的杂交又需要注意些什么呢?是采用液相效率高还是固相效率高?采用多种探针同时对该区域进行杂交,是否效率更高?或者有没有什么成熟的解决方案呢?
答案详细满意的话,另有答谢。
如果还能提供其他参考资料,那将非常感谢。
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shuangyin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kmuqx59: 金币+10, 有帮助, 谢谢 2014-12-11 19:08:37
既然要杂交100kb以上的片段就不能用常规方法提DNA了,一般方法提的gDNA长度都只有几十kb。要在低熔点胶里提取以及酶切,以保证片段长度。另外这么长的片段就不要转膜了,电泳完直接在胶里面杂交
2楼2014-12-05 16:18:44
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