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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？
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青豆纹

新虫 (初入文坛)

[求助] 第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？ 已有13人参与

培养箱有几个月没用，我喷了酒精封闭消毒了一个晚上。培养基高压湿热灭菌时达到0.1mMPa过了15min拔插头，没有冷却立即移入生化培养箱中。

第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？
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第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？-1
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第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？-9
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第一次制作培养基，全长菌了！！怎么办？-10
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1楼 2014-11-18 11:41:38
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by lvins at 2014-11-18 14:59:06
可以考虑这些环节：灭菌时间够不够；平板本身是否灭菌；倒平板是否在无菌操作。

谢谢您的回答！！我的平板用干燥箱开到160℃灭了两个小时，原因应该是灭菌的时间以及操作的不规范，我是参照我同学以前的做法，把溶解在烧杯里 的培养基直接倒在培养皿里然后放在高压灭菌锅里灭菌的，，极不规范的操作啊。。。
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18楼2014-11-21 20:55:21
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 判官小艾 at 2014-11-18 15:20:03
看着像是污染了霉菌，培养基灭菌时间是否足够，平板是否灭菌 再有就是是否在超净台操作或者无菌室操作。倒板前楼主是否注意到个人卫生，是否用酒精棉球擦拭双手等，希望对你有帮助

O(∩_∩)O谢谢您的回答！！时间应该是够的，不过像-在超净工作台以及用酒精擦拭双手等都没有做到，，，以后配培养基要注意！！
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19楼2014-11-21 20:57:36
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by 云忠听雨 at 2014-11-18 16:05:34
哇，好多菌，磨刀不误砍柴工，建议你先把培养箱清理一下吧，试验时怎么无菌怎么来。双手以及接触品都最好彻底消毒。

是啊，后来又把培养箱很仔细的灭了一遍菌！以后双手还有环境都得相当注意，这第一次还是有点太随意了！谢谢您的回答！
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20楼2014-11-21 20:59:44
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by gaolt at 2014-11-18 16:38:17
应该是灭菌的时间不够，丢掉重新操作一次吧！

嗯，这一批我全给丢掉了！准备好好按规范以及按你们给我提的应该注意的地方来好好配置一次！
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21楼2014-11-21 21:01:42
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 07bio at 2014-11-19 08:50:09
长霉菌了，灭菌后丢了吧。重新配过，可以灭菌20min，不要把电源，自然冷却至50℃无菌条件下倒平板。培养箱也要保证无菌。

要灭菌了再丢掉啊，，我是直接从培养箱拿出来，把培养基倒掉了洗了然后把培养皿灭菌的，这样应该没什么问题吧？培养箱已经很仔细灭过菌了，就是之前没有按规范来没有等它自然冷却，这点下次配置的时候我要万分注意！！谢谢您哦！
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22楼2014-11-21 21:05:23
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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7楼: Originally posted by tiu007 at 2014-11-19 09:08:38
你这肯定是灭菌的问题，检查灭菌锅吧！根据你的描述，还得拔插头，肯定是国产需要手动操作那种，需要注意一个问题，灭菌开始前先排气，当排出气体为热蒸汽时，再保压灭菌！

是国产的高压灭菌锅，要自己看着时间灭菌，，我是整个灭完了才用放气阀放气的，，谢谢您回答啦！！！
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23楼2014-11-21 23:04:07
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by cory0931 at 2014-11-19 09:11:50
别扯没用的，操作规范不？
平皿无菌不？
师弟师妹做的55--60℃才倒板子，也没加长杂菌；
你倒完了板子，是不是在台子里用紫外一直照着？
为什么是立即拿到培养箱里？

我后来仔细的翻了翻微生物实验的书，自己的操作确实很不规范，，，谢谢您的回答！
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24楼2014-11-21 23:06:11
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 愤怒的家雀 at 2014-11-19 15:18:34
灭菌不彻底啊，到平板时温度高一点！

温度应该是够的，这种培养基规定就是121℃，，，和我操作不规范有很大关系，准备按照规范再做一次！！谢谢您的回答啦！
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25楼2014-11-21 23:07:45
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青豆纹

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by 小白vs悠言 at 2014-11-19 16:07:09
已经长杂菌了，板肯定是不能用了，建议把板灭了重新做。再次操作的时候要注意：1 倒板前平皿已灭菌；2灭菌时间足够；3注意无菌操作；4将倒过的板拿到培养箱的过程中要小心，保证平皿的盖子未打开。

嗯 是啊 已经把这批培养基处理了  您说的这几点我下次配置时要注意！谢谢您的回答！！
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26楼2014-11-21 23:09:28
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