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yqlmshui

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3楼2012-08-30 22:58:05

stone2239

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6楼: Originally posted by yqlmshui at 2013-10-14 10:11:40
是的，我就灭的20min，但是有个问题是PEG浓度越高，培养基越难凝固...

不建议用直接灭菌的方法，还是按2楼回复的，参照朱健康的方法做吧，不然做出来写了文章也不好发，现在朱健康的方法已得到广泛认可了。

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8楼2013-11-18 02:07:26

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推迟满足感

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yqlmshui: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-08-30 22:51:05

您好，最近我也在做不同浓度的PEG6000加入培养基中做渗透胁迫，我查了文献说最好过滤灭菌，但是我自己做了一下，一个小时才能过滤100ml太慢了，我正在查找是否可以高温灭菌处理。但是还没查到！
含PEG固体培养基的配置。
分别配MS+1.2%agar (pH5.7)以及MS+5 mM MES（pH5.7,-agar), 一同灭菌，前者稍凉后倒平板，等待凝固；将PEG按需求趁热加入后者，混匀，倒在前者凝固好的平板上，盖上培养皿盖，过夜平衡，一二天一早倒掉后者的液体，稍吹干后即为含PEG的平板。来源：参考朱健康实验室2004年发在Plant J上的文章附件。
这个你可以看一下。

2楼2012-08-30 09:58:54

wangwei2008

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4楼2012-08-31 10:28:30

yuehongshan

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3楼: Originally posted by yqlmshui at 2012-08-30 22:58:05
后来我又查了一下，过滤灭菌的话，PEG6000溶解度比50%高一点，这样的话100ml培养基里要加很多（比如10%就要加20ml）。
PEG6000分子量大可以高温灭菌的，对实验没什么影响。我做了一周多已经能看出差别了。...

你好，麻烦咨询一下，你的PEG6000是加入培养基中以后再高温灭菌吗？是用多少度灭多久呢？

5楼2013-10-10 16:14:40

yqlmshui

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6楼2013-10-14 10:11:40

yuehongshan

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6楼: Originally posted by yqlmshui at 2013-10-14 10:11:40
是的，我就灭的20min，但是有个问题是PEG浓度越高，培养基越难凝固...

谢谢

7楼2013-10-15 09:13:48

lanseyuan56

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2楼: Originally posted by 推迟满足感 at 2012-08-30 09:58:54
您好，最近我也在做不同浓度的PEG6000加入培养基中做渗透胁迫，我查了文献说最好过滤灭菌，但是我自己做了一下，一个小时才能过滤100ml太慢了，我正在查找是否可以高温灭菌处理。但是还没查到！
含PEG固体培养基的 ...

请问一下，加的PEG是过滤灭菌的吗？

9楼2013-11-23 10:55:39

lanseyuan56

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6楼: Originally posted by yqlmshui at 2013-10-14 10:11:40
是的，我就灭的20min，但是有个问题是PEG浓度越高，培养基越难凝固...

你是按照朱健康的方法，直接加在第二个培养基里灭菌吗？

10楼2013-11-23 10:58:28