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yqlmshui

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lanseyuan56

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yqlmshui at 2013-10-14 10:11:40
是的,我就灭的20min,但是有个问题是PEG浓度越高,培养基越难凝固...

你是按照朱健康的方法,直接加在第二个培养基里灭菌吗?
10楼2013-11-23 10:58:28
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新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yqlmshui: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-08-30 22:51:05
您好,最近我也在做不同浓度的PEG6000加入培养基中做渗透胁迫,我查了文献说最好过滤灭菌,但是我自己做了一下,一个小时才能过滤100ml太慢了,我正在查找是否可以高温灭菌处理。但是还没查到!
含PEG固体培养基的配置。
分别配MS+1.2%agar (pH5.7)以及MS+5 mM MES(pH5.7,-agar), 一同灭菌,前者稍凉后倒平板,等待凝固;将PEG按需求趁热加入后者,混匀,倒在前者凝固好的平板上,盖上培养皿盖,过夜平衡,一二天一早倒掉后者的液体,稍吹干后即为含PEG的平板。来源:参考朱健康实验室2004年发在Plant J上的文章附件。
这个你可以看一下。
2楼2012-08-30 09:58:54
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yqlmshui

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3楼2012-08-30 22:58:05
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yuehongshan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yqlmshui at 2012-08-30 22:58:05
后来我又查了一下,过滤灭菌的话,PEG6000溶解度比50%高一点,这样的话100ml培养基里要加很多(比如10%就要加20ml)。
PEG6000分子量大可以高温灭菌的,对实验没什么影响。我做了一周多已经能看出差别了。...

你好,麻烦咨询一下,你的PEG6000是加入培养基中以后再高温灭菌吗?是用多少度灭多久呢?
5楼2013-10-10 16:14:40
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