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蓝索道人木虫 (正式写手)
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[求助]
GC-rich and repeated DNA 已有1人参与
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各位，最近想扩增一段DNA（全长3800bp平均GC含量73%，部分重复区域（3000bp）达到80%以上），大体思路如下： 提取总RNA-反转录-PCR或者提基因组-PCR（两种方法都试过） 用的是全式金的Fasrpfu、hifi酶 调整过温度（55-65）、试过加GC enhancer或stimulate、MgSO4;更换过不同组织的细胞提取基因组；尝试过更换引物 但扩增出来的不是目的序列，目前陷入瓶颈 在此向各位请教，有什么建议啊，是不是要换个酶，还是引物特异性不好，还是反转录没做好？ 真心要崩溃了啊 |
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