24小时热门版块排行榜    

查看: 1086  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

原始深林

银虫 (初入文坛)

[求助] 结合转移 已有2人参与

有没有哪位大神做结合转移的呀,我做大肠杆菌和双歧杆菌的结合转移已经两个月了,一直无法成功呀,求大神指点呀,不胜感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

实验狗伤不起,改行好不好
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
原始深林: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-30 08:27:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by 原始深林 at 2014-10-29 09:53:06
根据文献是大肠和双歧接触会将质粒导入到双歧中,大肠是构建的工程菌呀,不知道怎么一直不成功,请问楼主是怎么做的结合呀,结合需要注意什么...

是按照成熟的体系进行的,应该很容易的。1、你用的是自杀质粒和可自主复制到质粒?如果是自主复制型的,是否在你做的菌中可用呢?2、另外就是抗性筛选是否合适?有没有可能是抗性基因没表达或活性较低。3、其他就是你做的菌的特性,比如细胞壁和细胞膜的结构,限制修饰系统等。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2014-10-29 17:30:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做过结合但不是双歧杆菌,你怎么做的不成功?如果可以通过结合应该很容易。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-10-28 18:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你这个菌以前没有做过接合转移,也就是说没有成熟的接合转移系统,就应该先摸索条件,包括热激活温度,预萌发时间,孢子浓度,大肠杆菌浓度,盖药时间,盖药终浓度等等。
3楼2014-10-28 21:12:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原始深林

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cuihao102 at 2014-10-28 21:12:36
如果你这个菌以前没有做过接合转移,也就是说没有成熟的接合转移系统,就应该先摸索条件,包括热激活温度,预萌发时间,孢子浓度,大肠杆菌浓度,盖药时间,盖药终浓度等等。

我是根据一篇外文文献做的,直接将大肠和双歧在平板上培养厌氧12h,大肠和双歧接触的话,质粒就可以转移到双歧当中了,大肠是构建好的工程菌,但是一直都没成功
实验狗伤不起,改行好不好
4楼2014-10-29 09:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +3 亭亭亭01 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:44 by jlnufan
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +3 15779376950 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:27 by 15779376950
[考研] 291分工科求调剂 +8 science饿饿 2026-03-01 9/450 2026-03-01 14:22 by Ducount.Y
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见