应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求芽孢孢子的破壁方法
51/1返回列表
查看: 1263  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

goldchengli

金虫 (小有名气)

[求助] 求芽孢孢子的破壁方法 已有2人参与

请问哪位虫子曾做过芽孢孢子破壁的实验，想提取里面的DNA，请各位虫子出谋献策。在此感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-23 14:09:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goldchengli

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 20093651 at 2014-10-24 08:14:23
4.1.1.1        酶法小量DNA提取
1．50mg菌体加1×TE稀释成2mg/ml 的溶菌酶500μL放入37℃摇床1—2小时；
2．加20%SDS 50μL 及蛋白酶pK 5μL震荡混匀1分钟, 放入55℃烘箱30-60分钟〔pK浓度为20ug/mL〕；
3．加550 μL ...

再跟你探讨一下
芽孢孢子最外面的两层结构，芽孢外壁和芽孢壳的主要成分是蛋白质，而溶菌酶主要作用粘多糖的糖苷键。需要一开始就加些蛋白酶吧？
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-24 14:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

樊夫子

木虫 (小有名气)

单身狗

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加溶菌酶下进行 超声波  不过时间得控制好，不然没都被破坏了
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-23 19:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就用溶菌酶37度过夜肯定可以的
赞一下 回复此楼
但行好事，莫问前程
3楼2014-10-23 20:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goldchengli

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 20093651 at 2014-10-23 20:35:20
就用溶菌酶37度过夜肯定可以的

请问您有具体的方法吗？溶菌酶浓度，buffer？
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-24 07:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭