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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » cDNA扩增
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laisforever

银虫 (小有名气)

[求助] cDNA扩增 已有3人参与

我对同样一批样品进行提取RNA，逆转录成cDNA，然后扩增目的条带
问题是：提取了2次RNA，得到的比值差别特别大，我就想问一下，这时候我应该做什么？
我认为应该是两次提取的RNA的问题，也有人说是cDNA的问题，就想跑一下cDNA，我没有跑过cDNA，
不知道跑出来的条带图应该是什么样子的，有人吗？指导一下
还是我应该再提取一次RNA，用这3次的结果做准
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selt

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人生在世，俯仰之间，唯有追求卓越，但求尽其所能.
1楼 2014-10-22 09:51:02
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selt

新虫 (小有名气)
★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 21:02:52
cDNA没法跑电泳看，你可以用cDNA做模板，扩增一下看家基因或目的基因再跑电泳、
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6楼2014-10-23 17:30:05
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梨涡浅笑096

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:23:52
laisforever: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-10-23 15:36:48
cDNA没法跑电泳。会不会是RNA有点降解或者是没混匀，可以用RNA跑个电泳看看，看是不是降解了。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-10-22 11:30:37
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:23:57
laisforever: 金币+2, ★有帮助 2014-10-23 15:37:00
楼主说的比值是什么，实验目的又是什么
建议看RNA，质量好，完整就没问题了。
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3楼2014-10-22 11:36:33
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大笨熊敏

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-24 21:02:42
cDNA跑出来是弥散带的，根本看不了。你想知道cDNA反转录成功没就是找个能扩得出条带的引物试验跑PCR看能扩出条带不。或者你上个RNA的图给我们看看，一般RNA提的没问题，反转录肯定是没问题的。
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4楼2014-10-22 20:52:29
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