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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 关于无机盐固体培养基配制的问题1
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苏木晴天

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于无机盐固体培养基配制的问题1 已有3人参与

近期开始做预实验，发现一个棘手的问题，我配置的无机盐固体培养基用于红球菌的筛选生长出现了问题，固体培养基高压灭菌之后，从灭菌锅里拿出来是深褐色的，倒出来后颜色较为重，（据之前的师姐说应该是很淡很淡的颜色才对）不知道是什么原因，求高手指教。
第一次的时候没有通过滤膜抽滤，第二次用了抽滤，发现没有变化，不知道问题出在哪里!!!
谢谢各位啦~~小女子感激不尽~~


无机盐固体培养基的配制方法是，：无机盐培养基（MSM）：4g Na2HPO4、1.5g KH2PO4、1g NH4Cl、0.2g MgSO4•7H2O、0.02g CaCl2、0.03g FeSO4•7H2O、1.0g NaNO3、1mL 微量元素/L培养基（每100mL溶液包括：0.25mg CoCl2•6H2O、0.37mg (NH4)6Mo7O24•4H2O、4.0mg CuSO4•5H2O、5.7mg H3BO3、4.3mg MnSO4•5H2O、4.3mg ZnSO4•7H2O），去离子水定容到1000mL，通过滤膜抽滤0.22微米规格的，然后加入15g/L的琼脂粉，121℃高压蒸汽灭菌20min；
如图1为刚灭菌后的（颜色是否有点重？）
图2为刚倒出来平板的颜色
图3为滤纸的规格
图4为最后MSM固体培养基的样子。

关于无机盐固体培养基配制的问题1
图1.jpg


关于无机盐固体培养基配制的问题1-1
图2.jpg


关于无机盐固体培养基配制的问题1-2
图3.jpg


关于无机盐固体培养基配制的问题1-3
图4.jpg


关于无机盐固体培养基配制的问题1-4
图5.jpg
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1楼 2014-10-18 21:33:56
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苏木晴天

铁虫 (初入文坛)
2楼2014-10-18 21:46:22
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sunny_阳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-10-20 18:09:20
你没提PH，我想主要原因是PH。其次琼脂粉溶解要达到完全透明
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无怒放，不青春
3楼2014-10-18 23:54:48
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阿里郎爱阿里

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助！ 2014-10-20 18:09:35
我现在也一直在做红球菌的诱导培养，无机盐固体培养基确实应该是颜色很淡的，看你的配方觉得应该是PH的问题，应该是偏酸了吧。我都是PH7.2左右的~~希望能对你有所帮助
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4楼2014-10-19 14:41:57
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苏木晴天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 阿里郎爱阿里 at 2014-10-19 14:41:57
我现在也一直在做红球菌的诱导培养，无机盐固体培养基确实应该是颜色很淡的，看你的配方觉得应该是PH的问题，应该是偏酸了吧。我都是PH7.2左右的~~希望能对你有所帮助

太好了，谢谢你，我这就去再试试。回头继续讨论哈。
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-20 08:41:37
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苏木晴天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sunny_阳 at 2014-10-18 23:54:48
你没提PH，我想主要原因是PH。其次琼脂粉溶解要达到完全透明

就是首先pH应该调到大概7以上另外，琼脂粉也要搅拌的均匀在放入锅内灭菌对吗？
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6楼2014-10-20 08:43:36
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sunny_阳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 苏木晴天 at 2014-10-20 08:43:36
就是首先pH应该调到大概7以上另外，琼脂粉也要搅拌的均匀在放入锅内灭菌对吗？...

我不是做该培养基的，pH多少按配方要求吧，只是想提醒你这点。琼脂粉需要加热溶解，至完全透明。
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无怒放，不青春
7楼2014-10-20 12:10:11
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时以过境未迁

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能有两个问题：酸碱度和配置过程出错。
配制时，最好是一种药品一种药品的加，并且是一种一种的溶解以后再混合，或者，你根据培养基的培养，按照他本来的药品顺序添加药品。
调节酸碱度，最好是在培养基煮好以后，如果是精密调节，要调高0.1个单位的酸碱度，因为灭菌过程可能会导致酸碱度降低0.1个单位左右。
希望有帮助
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上善若水-镜花水月-明镜止水
8楼2014-10-20 16:54:45
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苏木晴天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 时以过境未迁 at 2014-10-20 16:54:45
可能有两个问题：酸碱度和配置过程出错。
配制时，最好是一种药品一种药品的加，并且是一种一种的溶解以后再混合，或者，你根据培养基的培养，按照他本来的药品顺序添加药品。
调节酸碱度，最好是在培养基煮好以后 ...

会场全面。谢谢哈。
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9楼2014-10-21 08:45:12
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