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启动子和信号肽之间存在不匹配的问题吗？如PgpdA和ssGlaA
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我在真菌的异源表达上遇到了问题。 我需要把一个目的基因（酶）转到黑曲霉中，希望实现实现异源表达把酶运输到胞外，用的是共转化的方法，自己构建的表达质粒。 我构建的质粒是这样的，PgpdA+ssGlaA+MCS+目的基因（去信号肽）+TtrpC，把表达质粒和共转化质粒（尿苷缺陷性）通过共转化转到黑曲霉里。 现在筛选到的转化子中能够提出RNA并且反转录出我的目的基因，但是胞外没有酶活，提胞外蛋白也找不到与空白对照之间的区别。 现在想知道有没有可能是启动子和信号肽的选择有问题，PgpdA是组成型强启动子，ssGlaA也是用的很广的信号肽，但是一般人都是用启动子PglaA和ssGlaA一起，想知道他们之间会不会有特定的比配，PgpdA和ssGlaA会不会不能一起用。 跪谢 |
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