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叮咚心泉88

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[求助] 最近切GST标签，用的是prescission protease，切不下来！已有3人参与

最近切GST标签，用的prescission protease，可是试过很多方法，都切不掉我的蛋白，如pH值，酶浓度，盐浓度，都不行，再切不下来，实验就进行不下去了。求高手指点！还有就是，每次酶切后，点电泳都会多出一条带，分子量和PP酶一样，难道是PP酶？我100ul体系，只加了0.1ul，不太可能啊！大家帮忙啊！

PP酶切 .jpg

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1楼 2014-10-14 19:49:21

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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-15 11:29:30

我多年前做过，未遇到你这样的问题。你能否肯定你的vector确实存在prescission protease识别顺序？是你自己做的？如果是别人的，建议测序验证以下。这可能是主要的。

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2楼2014-10-14 22:27:18

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叮咚心泉88

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2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-14 22:27:18
我多年前做过，未遇到你这样的问题。你能否肯定你的vector确实存在prescission protease识别顺序？是你自己做的？如果是别人的，建议测序验证以下。这可能是主要的。

那多出来的带是怎么回事啊？我实在想不通，能帮我分析分析么？

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3楼2014-10-15 08:41:15

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