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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达不出来

我前期把一段基因连接到pet-21b载体上,然后转化到大肠杆菌Bl21中,经IPTG诱导后得到的表达产物与上样混合后沸水煮沸10分钟,跑SDS-PAGE但一直都没有得到特异表达的蛋白条带,已经作了差不多半年了,摸索了很多条件都没有成功 ,请各位帮我找找原因。将不胜感激
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xdfd

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by nnxqwei at 2008-4-28 23:33:
5.如果再不行的话,分析一下你基因mRNA翻译起始区的二级结构,如果该区形成发荚结构,该mRNA就会阻止其与30s核糖体亚单位结合,翻译无法开始;

该怎么检测呀
9楼2008-04-29 17:13:25
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

哪位大虾做过这方面的实验,给我指出一些思路吧,郁闷中!!!!!!!
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2楼2008-04-28 13:03:26
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huaershi

你做菌落PCR了吗?目的基因在不在里面呢?
3楼2008-04-28 13:50:13
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hfztim

至尊木虫 (正式写手)

SDS-PAGE没有看到目的蛋白的话不能说明基因没有表达,建议做western看看
4楼2008-04-28 15:45:51
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