24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 837  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达不出来

我前期把一段基因连接到pet-21b载体上,然后转化到大肠杆菌Bl21中,经IPTG诱导后得到的表达产物与上样混合后沸水煮沸10分钟,跑SDS-PAGE但一直都没有得到特异表达的蛋白条带,已经作了差不多半年了,摸索了很多条件都没有成功 ,请各位帮我找找原因。将不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢

戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huaershi

你做菌落PCR了吗?目的基因在不在里面呢?
3楼2008-04-28 13:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

哪位大虾做过这方面的实验,给我指出一些思路吧,郁闷中!!!!!!!
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2008-04-28 13:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfztim

至尊木虫 (正式写手)

SDS-PAGE没有看到目的蛋白的话不能说明基因没有表达,建议做western看看
4楼2008-04-28 15:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

个人觉得没表达出来有以下几方面原因:1,目的片段是否正确连接到载体中,一定要测序鉴定;2,看看是不是你的目的基因里有很多大肠杆菌的稀有密码子,如果很多的话很有可能表达不出来,就要设计点突变.
5楼2008-04-28 19:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309求调剂 +7 谁不是少年 2026-03-29 7/350 2026-03-29 13:17 by mumin1990
[考研] 070305高分子化学与物理 304分求调剂 +11 c297914 2026-03-28 11/550 2026-03-29 13:11 by peike
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +3 真名有冰 2026-03-29 4/200 2026-03-29 08:47 by qingfeng258
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 8/400 2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
信息提示
请填处理意见