24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 835  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达不出来

我前期把一段基因连接到pet-21b载体上,然后转化到大肠杆菌Bl21中,经IPTG诱导后得到的表达产物与上样混合后沸水煮沸10分钟,跑SDS-PAGE但一直都没有得到特异表达的蛋白条带,已经作了差不多半年了,摸索了很多条件都没有成功 ,请各位帮我找找原因。将不胜感激
回复此楼
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hao6510

金虫 (小有名气)

你用的什么酶切位点?实在不行换表达系统
办法总比问题多
12楼2008-05-03 21:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

哪位大虾做过这方面的实验,给我指出一些思路吧,郁闷中!!!!!!!
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2008-04-28 13:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huaershi

你做菌落PCR了吗?目的基因在不在里面呢?
3楼2008-04-28 13:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfztim

至尊木虫 (正式写手)

SDS-PAGE没有看到目的蛋白的话不能说明基因没有表达,建议做western看看
4楼2008-04-28 15:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +5 @taotao 2026-03-29 5/250 2026-03-29 11:06 by PPPPPccc
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 086000生物与医药调剂 +4 Feisty。 2026-03-28 8/400 2026-03-29 07:32 by 云游重阳
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +3 Nadiums 2026-03-25 4/200 2026-03-29 00:50 by 544594351
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么! 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
请填处理意见