24小时热门版块排行榜    

查看: 2941  |  回复: 19

蠹鱼

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jian212 at 2014-09-29 15:39:44
换成PET-32的话位点可以用的。

什么意思,直接酶切连接就行?
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
11楼2014-09-29 16:02:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)


蠹鱼(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-29 19:48:50
引用回帖:
8楼: Originally posted by 蠹鱼 at 2014-09-29 15:37:43
结果是什么样子,不可行?...

位点不唯一你就不知道目的序列连在载体哪一段了,转化下来的效率也很低。一般都选在多克隆区域的位点
追随自己的心!不要做让自己后悔的事!
12楼2014-09-29 16:46:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
蠹鱼: 金币+1 2014-09-30 08:45:12
蠹鱼: 金币+2 2014-09-30 08:50:53
引用回帖:
11楼: Originally posted by 蠹鱼 at 2014-09-29 16:02:20
什么意思,直接酶切连接就行?...

恩,可以直接酶切连接的。NdeI 在同一侧,不影响的。
学习再学习,努力再努力。
13楼2014-09-29 16:50:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蠹鱼

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by jian212 at 2014-09-29 16:50:52
恩,可以直接酶切连接的。NdeI 在同一侧,不影响的。...

您和人家回复的都不一样,更给详细的说明吗?
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
14楼2014-09-30 08:44:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蠹鱼

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by jian212 at 2014-09-29 16:50:52
恩,可以直接酶切连接的。NdeI 在同一侧,不影响的。...

HindIII  1  173
NdeI    2   346  691
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
15楼2014-09-30 08:50:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-30 18:34:43
蠹鱼: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-30 19:30:49
引用回帖:
15楼: Originally posted by 蠹鱼 at 2014-09-30 08:50:26
HindIII  1  173
NdeI    2   346  691...

PDF 上传不了,你可以查下PET-32 的图谱,NdeI 之间是一个
Trx•Tag coding sequence 366-692
切掉的话对你没什么影响的。
你用NdeI 和HindIII 酶切保留的是 173 、691 位的位点,中间部分切掉了。所以对你没什么影响的。
学习再学习,努力再努力。
16楼2014-09-30 10:50:54
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dychad

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
蠹鱼: 金币+4, 有帮助 2014-11-09 17:18:43
不表达的原因很多,首先,有没有测序啊,进行测序看看,是不是出发点的基因出现了错误;然后,换一换宿主和载体,这是常用的套路,理论上用酶切是可以的,但是要设计好。
PBAD不知道,查一查资料吧
祝实验顺利!
17楼2014-11-09 17:17:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蠹鱼

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by dychad at 2014-11-09 17:17:46
不表达的原因很多,首先,有没有测序啊,进行测序看看,是不是出发点的基因出现了错误;然后,换一换宿主和载体,这是常用的套路,理论上用酶切是可以的,但是要设计好。
PBAD不知道,查一查资料吧
祝实验顺利!

啥套路?
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
18楼2014-11-09 17:18:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dychad

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
蠹鱼: 金币+12, 有帮助 2014-11-09 17:20:57
引用回帖:
18楼: Originally posted by 蠹鱼 at 2014-11-09 17:18:56
啥套路?...

设计引物,PCR,换酶切位点
19楼2014-11-09 17:20:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蠹鱼

木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by dychad at 2014-11-09 17:20:35
设计引物,PCR,换酶切位点...

老笼统,反正也没有别人回复,都给你把
少一分浮躁,多一分踏实。少一分侥幸,多一分努力。
20楼2014-11-09 17:21:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蠹鱼 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见