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关于双歧杆菌的一些疑问
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有没有做过双歧杆菌培养、转化等工作的虫子?本人正准备做双歧杆菌表达外源性基因方面的实验。现有一些问题没有搞懂,希望得到各位过来人的帮助。问题如下: 1. 双歧杆菌的接种操作,转化操作都需要在厌氧环境中完成吗?如果没有厌氧培养箱,只有厌氧培养罐,怎样保证接种或转化过程中的无氧环境,有没有什么简易的装置可以使用? 2. pET系列,pGEX系列的质粒是否合适用来构建能在大肠及双歧杆菌中表达的穿梭质粒?如果不合适,应该使用哪一种质粒?最好能推荐含有T7启动子的。 3. 双歧杆菌中有T7 RNA聚合酶吗,如果想要让其获得T7 RNA聚合酶,有什么方法。除了双歧杆菌,有哪些厌氧菌或者兼性厌氧菌有T7 RNA聚合酶的? 4. 是否可以考虑共转质粒的方法,将含有目标基因的质粒及表达T7 RNA聚合酶的质粒共转进同一个双歧杆菌中来解决问题3? |
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