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spring1921

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!!!已经把有机相降到15了,但峰还是分不开,求大神指路 已有10人参与

做的是橙皮苷的标准品,流动相是乙腈:磷酸水溶液(pH=2.4) 15:85 v:v 试过如果再降低有机相的话就出不了峰了
试了很多峰形还是不好,该怎么办呢

求助!!!已经把有机相降到15了,但峰还是分不开,求大神指路
IMG_20140915_221042.jpg
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byy08

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
甲醇-醋酸条件下梯度洗脱,橙皮苷的分离度很好啊
6楼2014-09-16 15:49:52
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王小跳

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流速一般不用调,因为一般调流速也仅仅是改变了相应的出峰时间,但出峰时间比例不会有太大变化,可以试试改变下柱温,或者改变流动相或者色谱柱什么的。
11楼2014-09-18 10:19:11
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普通回帖

匿名

禁虫 (知名作家)

本帖仅楼主可见
2楼2014-09-16 06:30:27
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dongbangwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个用梯度洗脱就可以分开的,前四分钟8:92,流速可以设定0.8ml\min,到5分钟流速增加到1,到10分钟有机相增加到20,后面的梯度可以根据你的实际情况改变。
弟子入则孝,出则弟,谨而信,泛爱众,而亲仁,行有余力,则以学文。
3楼2014-09-16 06:57:02
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定是橙皮苷的标品?标品怎么会有这么多东西在?
是10分钟左右那个峰吗?
试过最低的有机相比例多少?
人生若只如初见...
4楼2014-09-16 09:15:22
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中宜金大分析

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换根分离高水溶性有机物的色谱柱试试,如agilent的SB-C18或TC-C18
5楼2014-09-16 15:13:23
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woniubaby

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
橙皮苷结构上有几个酚羟基,估计优点酸性吧,卤煮可以试一下换根柱子,或者把流动相换一下,不用磷酸用三氟乙酸试试
Doing what you like is freedom, liking what you do is happiness.
7楼2014-09-17 08:36:42
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Pian_tong

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的流动相酸性很大,我想问一下你的溶剂是什么?就是流动相本身吗?
因为你的样品如果是中性,进入色谱柱就会出现这种情况。

如果溶剂没有问题,那就变换方法。流动相调节成梯度洗脱是一种思路。更换色谱柱也是一种思路,变成C8或者苯基的柱子看看情况。
8楼2014-09-18 08:21:38
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乱世加人

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你调没调过PH值啊往碱里调一下试试

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-09-18 08:31:54
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xy201209

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先考虑确定对照品是哪(几)个峰,峰形不太好可注意样品溶剂效应或考虑流动相用缓冲盐试试。
10楼2014-09-18 09:23:19
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