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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助！！！已经把有机相降到15了，但峰还是分不开，求大神指路
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spring1921

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！！！已经把有机相降到15了，但峰还是分不开，求大神指路 已有10人参与

做的是橙皮苷的标准品，流动相是乙腈：磷酸水溶液（pH=2.4) 15:85 v:v 试过如果再降低有机相的话就出不了峰了
试了很多峰形还是不好,该怎么办呢

求助！！！已经把有机相降到15了，但峰还是分不开，求大神指路
IMG_20140915_221042.jpg
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1楼 2014-09-16 02:05:45
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

byy08

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甲醇-醋酸条件下梯度洗脱，橙皮苷的分离度很好啊
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6楼2014-09-16 15:49:52
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王小跳

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流速一般不用调，因为一般调流速也仅仅是改变了相应的出峰时间，但出峰时间比例不会有太大变化，可以试试改变下柱温，或者改变流动相或者色谱柱什么的。
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11楼2014-09-18 10:19:11
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普通回帖

匿名

禁虫 (知名作家)
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2楼2014-09-16 06:30:27
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dongbangwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个用梯度洗脱就可以分开的，前四分钟8:92，流速可以设定0.8ml\min，到5分钟流速增加到1，到10分钟有机相增加到20，后面的梯度可以根据你的实际情况改变。
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弟子入则孝，出则弟，谨而信，泛爱众，而亲仁，行有余力，则以学文。
3楼2014-09-16 06:57:02
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定是橙皮苷的标品？标品怎么会有这么多东西在？
是10分钟左右那个峰吗？
试过最低的有机相比例多少？
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人生若只如初见...
4楼2014-09-16 09:15:22
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中宜金大分析

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

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换根分离高水溶性有机物的色谱柱试试，如agilent的SB-C18或TC-C18
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5楼2014-09-16 15:13:23
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woniubaby

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
橙皮苷结构上有几个酚羟基，估计优点酸性吧，卤煮可以试一下换根柱子，或者把流动相换一下，不用磷酸用三氟乙酸试试
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Doing what you like is freedom, liking what you do is happiness.
7楼2014-09-17 08:36:42
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Pian_tong

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的流动相酸性很大，我想问一下你的溶剂是什么？就是流动相本身吗？
因为你的样品如果是中性，进入色谱柱就会出现这种情况。

如果溶剂没有问题，那就变换方法。流动相调节成梯度洗脱是一种思路。更换色谱柱也是一种思路，变成C8或者苯基的柱子看看情况。
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8楼2014-09-18 08:21:38
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乱世加人

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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你调没调过PH值啊往碱里调一下试试

[ 发自小木虫客户端 ]
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无
9楼2014-09-18 08:31:54
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xy201209

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先考虑确定对照品是哪（几）个峰，峰形不太好可注意样品溶剂效应或考虑流动相用缓冲盐试试。
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10楼2014-09-18 09:23:19
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