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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 为何培养基有沉淀？如何测生长曲线？
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zsliluke

铜虫 (小有名气)

[求助] 为何培养基有沉淀？如何测生长曲线？已有6人参与

Na2S2O3.5H2O 5g
KNO3 2g  
Na2HCO3 1g  
KH2PO4 2g  
MgSO4.7H2O 0.5g  
CaCl2  0.05g  
NH4Cl 0.5g  调节pH至7.0。
121°20min灭菌后发现瓶底有白色絮状沉淀？不知为何？
打算用OD值测菌株7天的生长曲线，每天一测，但是这么浑浊能测出来吗？？？

为何培养基有沉淀？如何测生长曲线？
20140915_214746_副本.jpg
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1楼2014-09-15 22:00:51
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zsliluke: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-09-16 16:58:32
主要是由于钙，镁离子会和磷酸，碳酸盐反应形成沉淀。建议钙，镁和基培养基分开灭菌，然后加入。你可以测一下OD，太高了就影响读数了。
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2楼2014-09-16 02:02:25
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zsliluke

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by RuyangHan at 2014-09-16 02:02:25
主要是由于钙，镁离子会和磷酸，碳酸盐反应形成沉淀。建议钙，镁和基培养基分开灭菌，然后加入。你可以测一下OD，太高了就影响读数了。

那分开灭菌钙，镁的浓度是多少？？应该配多少ml？？
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3楼2014-09-16 16:59:11
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zsliluke: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-09-17 15:21:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by zsliluke at 2014-09-16 16:59:11
那分开灭菌钙，镁的浓度是多少？？应该配多少ml？？...

这还是问题啊，随便配都可以，没有答案。比如你配100mL, 可以把钙加在10mL水里，镁加在10mL水里，其他在80mL 水里，灭菌后混合即可。
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4楼2014-09-17 05:24:04
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xiaoq_tiansh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zsliluke: 金币+5, ★有帮助 2014-09-17 15:20:58
如果不好测OD值，可以采用涂平板的方法测。
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5楼2014-09-17 09:44:41
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云忠听雨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么菌要张七天？这还能做出生长曲线么？这么多的钙镁离子肯定有沉淀的，只是为了调节ph的吧。
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6楼2014-09-17 10:51:46
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zsliluke

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 云忠听雨 at 2014-09-17 10:51:46
什么菌要张七天？这还能做出生长曲线么？这么多的钙镁离子肯定有沉淀的，只是为了调节ph的吧。

脱氮硫杆菌
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7楼2014-09-17 15:20:30
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zsliluke

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoq_tiansh at 2014-09-17 09:44:41
如果不好测OD值，可以采用涂平板的方法测。

涂平板也不好测吧，稀释多少倍也不清楚啊
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8楼2014-09-17 15:20:53
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zsliluke

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by RuyangHan at 2014-09-17 05:24:04
这还是问题啊，随便配都可以，没有答案。比如你配100mL, 可以把钙加在10mL水里，镁加在10mL水里，其他在80mL 水里，灭菌后混合即可。...

其实就是需要的锥形瓶多了一倍。钙和镁一起配一瓶，其他一瓶各50ml，混合100ml就可以了是吧？
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9楼2014-09-17 15:22:04
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dhd9978086

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不影响你的实验目的，可以不考虑
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做我自己！
10楼2014-09-17 16:22:47
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