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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 枯草内源蛋白质的重组表达
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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 枯草内源蛋白质的重组表达 已有1人参与

请教各位大虾。枯草芽孢杆菌中有许多内源蛋白，表达量本来就比较高。我把这个蛋白PCR后，克隆到pMA5载体中，转入WB800表达。事实上WB800本来就大量分泌这个蛋白，现在我又转入了专门表达这个蛋白的的质粒。原本我是期望这个蛋白能够大量表达的。结果检测发现，这个蛋白的表达并没有变高，甚至SDS-PAGE都不明显了了。这个是为什么呢？
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1楼 2014-09-11 21:50:10
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能干扰了正常内源蛋白的表达

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-09-12 20:11:18
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xissy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-12 20:11:18
可能干扰了正常内源蛋白的表达

如果干扰了正常内源蛋白的表达，载体目的蛋白也要表达吧。现在我怀疑是不是有个反馈系统，能够调节该蛋白的表达。但是调节也是调节染色体上的蛋白表达吧，转入的载体蛋白也可以吗。
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3楼2014-09-15 11:35:16
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