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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 枯草内源蛋白质的重组表达 已有1人参与

请教各位大虾。枯草芽孢杆菌中有许多内源蛋白,表达量本来就比较高。我把这个蛋白PCR后,克隆到pMA5载体中,转入WB800表达。事实上WB800本来就大量分泌这个蛋白,现在我又转入了专门表达这个蛋白的的质粒。原本我是期望这个蛋白能够大量表达的。结果检测发现,这个蛋白的表达并没有变高,甚至SDS-PAGE都不明显了了。这个是为什么呢?
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bio_sci

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可能干扰了正常内源蛋白的表达

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-09-12 20:11:18
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-12 20:11:18
可能干扰了正常内源蛋白的表达

如果干扰了正常内源蛋白的表达,载体目的蛋白也要表达吧。现在我怀疑是不是有个反馈系统,能够调节该蛋白的表达。但是调节也是调节染色体上的蛋白表达吧,转入的载体蛋白也可以吗。
3楼2014-09-15 11:35:16
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