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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 测定多糖分子量的色谱条件，各个峰的分离度需要很好吗
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宁静de夏

金虫 (正式写手)

[求助] 测定多糖分子量的色谱条件，各个峰的分离度需要很好吗 已有2人参与

GPC测定多糖分子量时，根据保留时间得出待测物分子量，那色谱条件需要能将分子量接近的峰完全分开吗？还是峰有部分重叠也可以呢？

另外，葡聚糖对照品是通用对照品吗？

求大神~~~~
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1楼 2014-09-10 15:53:46
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
宁静de夏: 金币+2, ★★★很有帮助, 3Q ~~~ 2014-09-15 11:25:23
尽可能的分开吧，如果只是想要大致的分子量，峰有部分重叠不会有太大的影响。
需要一系列分子量的标品去做标准曲线，要看你目标物分子量的分布范围来定。标品不只有葡聚糖的，还有其他的，看需要来定
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人生若只如初见...
2楼2014-09-11 10:18:23
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宁静de夏

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-09-11 10:18:23
尽可能的分开吧，如果只是想要大致的分子量，峰有部分重叠不会有太大的影响。
需要一系列分子量的标品去做标准曲线，要看你目标物分子量的分布范围来定。标品不只有葡聚糖的，还有其他的，看需要来定

目标物分子量大概20万左右，我选葡聚糖分子量4万到40万的五个点是不是可以呢？
走标品的时候都是单个单个走，不存在峰分没分开的问题，走样品时两个峰有部分重叠可以吗？
另外刚开始摸条件时是用样品摸吗？色谱条件一般需要达到什么程度呢？
第一次做分子排阻色谱，还请多多指教~~
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3楼2014-09-11 10:40:57
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
宁静de夏: 金币+3, ★★★很有帮助, 3Q~~ 2014-09-15 11:25:34
1、理论上，应该是分离度达到要求最好，如果分离有干扰，也会干扰结果。
2、大概知道分子量，你可以在已知分子量周围的点多些，其他的远些，不建议点平均排开。
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4楼2014-09-11 11:24:23
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宁静de夏

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-09-11 11:24:23
1、理论上，应该是分离度达到要求最好，如果分离有干扰，也会干扰结果。
2、大概知道分子量，你可以在已知分子量周围的点多些，其他的远些，不建议点平均排开。

请问摸条件时，样品保留时间多少合适呢？如果样品中两个多糖的分子量很接近，分不开是不是就要考虑两根柱子串联了？
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5楼2014-09-12 10:13:19
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 宁静de夏 at 2014-09-12 10:13:19
请问摸条件时，样品保留时间多少合适呢？如果样品中两个多糖的分子量很接近，分不开是不是就要考虑两根柱子串联了？...

可以这么考虑，但是串联又会受柱压的限制。如果能达到分离度，还是可以的。

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6楼2014-09-12 13:51:44
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宁静de夏

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-09-12 13:51:44
可以这么考虑，但是串联又会受柱压的限制。如果能达到分离度，还是可以的。
...

请问这种方法是不是每次测分子量都得做标曲呢？还是证明一定范围内线性好之后可以用外标一点法呢？
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7楼2014-09-12 15:08:44
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 宁静de夏 at 2014-09-12 15:08:44
请问这种方法是不是每次测分子量都得做标曲呢？还是证明一定范围内线性好之后可以用外标一点法呢？...

理论上每次都要重新配，但是一般都是可以用几次的，除非仪器维修过或者长时间不用

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8楼2014-09-12 20:41:38
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看你行不行

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-09-11 10:18:23
尽可能的分开吧，如果只是想要大致的分子量，峰有部分重叠不会有太大的影响。
需要一系列分子量的标品去做标准曲线，要看你目标物分子量的分布范围来定。标品不只有葡聚糖的，还有其他的，看需要来定

可以留下联系方式不，qq，微信都行，想咨询下您有关多糖分子量的问题，谢谢
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坚挺的活着，相信美好的未来
9楼2015-03-10 16:06:21
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