| 查看: 1744 | 回复: 3 | ||
[求助]
如何用CFDASE探针测定细菌胞内PH值？
|
|
最近需要测定阪崎肠杆菌胞内的ph值，请问哪位大神亲自做过这方面的实验~~ 我用的方法是用CFSE荧光染料（东仁化学科技），但是做了几次标准曲线，发现加了染料和不加染料的荧光强度没有什么差别。。。。 以下是我做标曲的方法: 1、 离心后收集细菌 2、 用包含50mmol/l EDTA的5mmol/l HEPES（ph 8）洗涤3次 3、 用包含1.5umol/l CFDASE的50mmol/l 磷酸盐缓冲液重新悬浮细菌，30℃孵育10分钟 4、 用50mmol/l的磷酸钾（ph 5.8）洗涤1次 5、 用10mmol/l的葡萄糖溶液30℃ 孵育30min 6、 用50mmol/l的磷酸钾洗涤 重新悬浮 之后将处理好的细菌置于不同ph值的缓冲液下（加了缬氨霉素和尼日利亚菌素），激发波长490nm 检测波长520nm测荧光强度，制作标准曲线。 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
weiwei619» 猜你喜欢
283求调剂 086004考英二数二
已经有10人回复
-
22408 327分求调剂
已经有3人回复
-
0831生医工第一轮调剂失败求助
已经有12人回复
-
机械专硕270求调剂，接受跨专业
已经有12人回复
-
288求调剂
已经有15人回复
-
293求调剂
已经有5人回复
-
271求调剂
已经有5人回复
-
一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂
已经有19人回复
-
272分材料子求调剂
已经有38人回复
-
电气工程专硕320求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 在无菌条件下，如何测细菌液体培养液的PH值
已经有6人回复
- 请问：培养基内的细菌死亡时会引起pH值降低吗？
已经有9人回复
- 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢
已经有25人回复
weiwei619
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1059.7
- 散金: 140
- 红花: 1
- 帖子: 106
- 在线: 57小时
- 虫号: 2193876
- 注册: 2012-12-18
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
2楼2016-07-14 11:59:57
云飞扬610
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 53.4
- 散金: 20
- 帖子: 64
- 在线: 24.3小时
- 虫号: 3820599
- 注册: 2015-04-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2018-06-23 22:59:06
4楼2018-07-30 10:54:47
