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Long-jiabao

新虫 (小有名气)

[求助] 两条互补的单链DNA(30bp)退火杂交 已有3人参与

两条互补的单链DNA(30bp),等比例混合在buffer中,95度,5min,然后自然冷却到室温 ,我想问的是室温下要放置多久才能完全杂交。还有需要加多少镁离子浓度?
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1057910381

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 夏至1990 at 2014-09-09 21:46:50
没分钟降5度,降14分钟,到25就行了,一般时间冲突我就会25度一直放着,吃完饭就做下一步,你是做cas9吗,相互交流吧...

对的,大家都做的Cas9吧,一般很好连得的,不会有问题的,放置室温1-2小时也就OK了
7楼2014-09-10 10:41:42
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1057910381

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-09 19:36:50
25℃ at 5℃/min  退火就可以了
2楼2014-09-09 16:42:26
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Long-jiabao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 1057910381 at 2014-09-09 16:42:26
25℃ at 5℃/min  退火就可以了

哦  我想知道有没有做过就是95度5min的 要放置在25度多久
3楼2014-09-09 19:30:28
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


同问,放多久

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-09-09 20:16:17
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