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[求助]
有关RACE的几个问题,大家来帮帮我啊! 已有2人参与
1. 3’ RACE相对好做一些,但是当基因3' RACE的测序结果出来之后在NCBI的blast比对后有时候会发现和别的物种相同基因的3'会相差那么几个碱基,同时用试剂盒做出来的自己基因的3'也是能找到Poly A尾巴的,那么这种情况下是继续往3’端RACE直到和别的物种3'端比对得到头还是怎么样,怎样确定一个基因RACE的3'端是不是已经到头了呢?(本人使用takara试剂盒)
2. 5’ RACE比较困难, 我用takara的5'试剂盒,有时候我也会用takara的genome walking试剂盒在基因组水平上试图找到基因的起始密码子,但是两种方法对我现在的基因效果都不太好,该怎么办呢?如果我的基因用一个试剂盒反复设计引物总是5'扩增不到头,是什么原因,我该怎么办呢?
大家快来帮帮我,总是这么耗着很郁闷的! |
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