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洋洋与羊羊

新虫 (初入文坛)

[求助] PAL,C4H和4CL酶活测定的方法和计算 已有1人参与

求助:最近要做PAL,C4H和4CL这三个酶的活性测定,但不太清楚最终结果是如何计算的
PAL这个酶我已经做了,方法如下:取1ml反应液,加入2ml 硼酸缓冲液 ,最后加入酶液1ml,使反应总体积为4ml,对照不加酶液,用硼酸缓冲液代替(对照仅用于调零用)。将所有试管置于37℃恒温水浴中保温30min,后加0.2ml  6mol/L HCl终止反应,后于290nm 处测定吸光值。
文献当中讲:以每小时在290nm处吸光值变化0.01所需酶量为一个酶活单位。(相当每毫升反应混合物形成1ug肉桂酸)。计算方法:
PAL活性:(0.01A/(gh))=△A*D/(0.01*W*t)  △A:为反应时间内光密度的变化,W为样品鲜重(g),t 为反应时间,D为稀释倍数,即提取的总酶液为反应系统酶液体积的倍数
想问:△A是怎么来的呀?(每个管在OD290只测了一个数据呀)

另外C4H和4CL这两个酶的测定方法网上也很不一致,而且计算方法更不清楚,有哪位前辈有做过这个实验的,请帮帮忙呀!
请 求各位大师多多指教,不胜感激呀
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莫小才

铜虫 (初入文坛)

你好,你的PAL酶测出来了吗
2楼2014-11-11 19:37:14
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LXY-

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用缓冲液调零,测出来的吸光值就是△A
3楼2014-11-19 16:51:38
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18330698622

金虫 (著名写手)

您好,请问这个问题你解决了吗
4楼2018-04-27 10:26:52
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下雨天1

铁虫 (初入文坛)

老师,您好,我最近也在做4CL酶活,您现在知道这个计算公式了么?期待您的回复
5楼2019-12-13 22:18:36
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