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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 静电纺丝膜做MTT毒性测试相关问题
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)

[交流] 静电纺丝膜做MTT毒性测试相关问题

静电纺丝膜想做MTT毒性检测，打算用大鼠骨髓间充质干细胞，有几个问题不太懂：
1.骨髓间充质干细胞接种密度是多少，打算用96孔板。
2.骨髓间充质干细胞细胞计数的时候可以用台盼蓝染色计数吗？
3.细胞毒性实验，是必须连续观测几天吗？比如：24,48,72h,再绘制生长曲线？可以只做一块板，然后算相对增殖度吗？
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ltlipc

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大家互相交流啊
1楼 2014-09-02 09:49:37
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)
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杨-杨杨: 金币+1 2014-09-02 11:29:38
杨-杨杨(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2015-02-05 09:12:09
1，用96孔板的话，建议密度不要太高，控制在每孔2000-3000个细胞左右吧
2. 计数的话可以用台盼蓝染色啊，这个应该没问题
3. 你只做一个板的话，如何做3个时间点？肯定是几个时间点做几个板啊，因为你要做MTT，测完细胞就废掉咯。
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2楼2014-09-02 10:25:47
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by ltlipc at 2014-09-02 10:25:47
1，用96孔板的话，建议密度不要太高，控制在每孔2000-3000个细胞左右吧
2. 计数的话可以用台盼蓝染色啊，这个应该没问题
3. 你只做一个板的话，如何做3个时间点？肯定是几个时间点做几个板啊，因为你要做MTT，测完 ...

接种细胞这么少啊？我看有的文献是10000~50000.毒性实验，有的文献只种了一个板，有的是连续观测，因为我的细胞量有限，不知道可以只设置一个组不？
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大家互相交流啊
3楼2014-09-02 11:29:32
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3楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 11:29:32
接种细胞这么少啊？我看有的文献是10000~50000.毒性实验，有的文献只种了一个板，有的是连续观测，因为我的细胞量有限，不知道可以只设置一个组不？...

连续观测就不是MTT实验了啊，而且MTT
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4楼2014-09-02 15:54:57
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)
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3楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 11:29:32
接种细胞这么少啊？我看有的文献是10000~50000.毒性实验，有的文献只种了一个板，有的是连续观测，因为我的细胞量有限，不知道可以只设置一个组不？...

细胞可以传代啊，多传几个皿不就够了吗？

而且建议同实验重复3次，结果一致方可信
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5楼2014-09-02 15:55:50
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ltlipc at 2014-09-02 15:55:50
细胞可以传代啊，多传几个皿不就够了吗？

而且建议同实验重复3次，结果一致方可信...

请问下您用过MTS吗？
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大家互相交流啊
6楼2014-09-02 16:17:31
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)
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6楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 16:17:31
请问下您用过MTS吗？...

看走眼了，MTS，一直看成MTT了，
个人认为啊，MTT,MTS,cck-8，WTS，这些实验都需要自己总结摸索具体条件。别人的意见仅供参考。因为细胞状态不同、细胞类别不同、加入药物不同都需要自己去体会摸索
活细胞中的脱氢酶将MTS转变成直接与细胞数目相关的可溶性甲腊盐。不需要冲洗不需要细胞收获，可直接进行比色，简便、敏感，但贵哦
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7楼2014-09-02 17:47:11
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DanielYa

新虫 (初入文坛)
★
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建议从细胞培养做起
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8楼2014-09-02 21:50:02
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by DanielYa at 2014-09-02 21:50:02
建议从细胞培养做起

建议你个头啦

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9楼2014-09-11 16:04:03
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