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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)

[交流] 静电纺丝膜做MTT毒性测试相关问题

静电纺丝膜想做MTT毒性检测,打算用大鼠骨髓间充质干细胞,有几个问题不太懂:
1.骨髓间充质干细胞接种密度是多少,打算用96孔板。
2.骨髓间充质干细胞细胞计数的时候可以用台盼蓝染色计数吗?
3.细胞毒性实验,是必须连续观测几天吗?比如:24,48,72h,再绘制生长曲线?可以只做一块板,然后算相对增殖度吗?
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ltlipc

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杨-杨杨: 金币+1 2014-09-02 11:29:38
杨-杨杨(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2015-02-05 09:12:09
1,用96孔板的话,建议密度不要太高,控制在每孔2000-3000个细胞左右吧
2. 计数的话可以用台盼蓝染色啊,这个应该没问题
3. 你只做一个板的话,如何做3个时间点?肯定是几个时间点做几个板啊,因为你要做MTT,测完细胞就废掉咯。
浅滩有沙,留水一方,无深无浅,我心荡漾。常年招收联合培养学生。有意者请留言。
2楼2014-09-02 10:25:47
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ltlipc at 2014-09-02 10:25:47
1,用96孔板的话,建议密度不要太高,控制在每孔2000-3000个细胞左右吧
2. 计数的话可以用台盼蓝染色啊,这个应该没问题
3. 你只做一个板的话,如何做3个时间点?肯定是几个时间点做几个板啊,因为你要做MTT,测完 ...

接种细胞这么少啊?我看有的文献是10000~50000.毒性实验,有的文献只种了一个板,有的是连续观测,因为我的细胞量有限,不知道可以只设置一个组不?
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3楼2014-09-02 11:29:32
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
3楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 11:29:32
接种细胞这么少啊?我看有的文献是10000~50000.毒性实验,有的文献只种了一个板,有的是连续观测,因为我的细胞量有限,不知道可以只设置一个组不?...

连续观测就不是MTT实验了啊,而且MTT
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4楼2014-09-02 15:54:57
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 11:29:32
接种细胞这么少啊?我看有的文献是10000~50000.毒性实验,有的文献只种了一个板,有的是连续观测,因为我的细胞量有限,不知道可以只设置一个组不?...

细胞可以传代啊,多传几个皿不就够了吗?

而且建议同实验重复3次,结果一致方可信
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5楼2014-09-02 15:55:50
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ltlipc at 2014-09-02 15:55:50
细胞可以传代啊,多传几个皿不就够了吗?

而且建议同实验重复3次,结果一致方可信...

请问下您用过MTS吗?
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6楼2014-09-02 16:17:31
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ltlipc

铁杆木虫 (著名写手)


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6楼: Originally posted by 杨-杨杨 at 2014-09-02 16:17:31
请问下您用过MTS吗?...

看走眼了,MTS,一直看成MTT了,
个人认为啊,MTT,MTS,cck-8,WTS,这些实验都需要自己总结摸索具体条件。别人的意见仅供参考。因为细胞状态不同、细胞类别不同、加入药物不同都需要自己去体会摸索
活细胞中的脱氢酶将MTS转变成直接与细胞数目相关的可溶性甲腊盐。不需要冲洗不需要细胞收获,可直接进行比色,简便、敏感,但贵哦
浅滩有沙,留水一方,无深无浅,我心荡漾。常年招收联合培养学生。有意者请留言。
7楼2014-09-02 17:47:11
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DanielYa

新虫 (初入文坛)


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建议从细胞培养做起
8楼2014-09-02 21:50:02
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杨-杨杨

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by DanielYa at 2014-09-02 21:50:02
建议从细胞培养做起

建议你个头啦

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9楼2014-09-11 16:04:03
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