28楼: Originally posted by wxy3937 at 2014-09-03 21:58:44
1) 昨天4度冰箱包埋的，拿出来之后室温平衡了15分钟，之前的实验均未平衡
2) 加缓冲液洗涤的时候轻一点，猜测是不是缓冲液打的太快会冲掉一部分蛋白
3) 同时做了变性和未变性蛋白，未变性的效果好
还有一个问题 ...

31楼: Originally posted by 张易120 at 2014-09-03 21:13:33
其实我做的盒子里A液和B 液都是现成的，不用自己配
...

32楼: Originally posted by wxy3937 at 2014-09-03 22:46:07
请问你有没有做过酶活和酶抑制试验，方便的话教教我。...

35楼: Originally posted by zq19881029 at 2014-09-04 14:18:37
你有没有先用碳酸盐缓冲液把蛋白包被在酶标板上啊？还有洗涤的时候貌似是不需要晃动的，静置放几分钟就可以了，一抗二抗的孵育应该在37度培养箱半个小时就足够了啊，TMB显色时间在10分钟以内。以上是我个人的小建议 ...

37楼: Originally posted by 留小保 at 2014-09-04 16:39:59
你最好看一下说明书，是在室温下1.5个小时吗，会不会是实验室温度低，最好还是在37度吧

38楼: Originally posted by berniehuang at 2014-09-05 14:30:20
抗体不是可以用于任何实验的，是否能用于ELISA是需要摸索的。不知LZ在制备单抗的时候，是用什么方法验证抗体的，ELISA？免疫荧光？流式？……有没有做过与天然蛋白的反应？在抗体没有问题的情况，再考虑实验方案。