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天空shm

铁虫 (小有名气)

[求助] 有关酶的保存问题 已有1人参与

小伙伴们,我最近要做乳果糖的检测和体外消化模拟两个实验,这两个实验都涉及到大量的酶,因为我买的一些酶的剂量很小,用天平压根就称不出来,很多都是直接粘在试剂的瓶上的,所以我想把这些酶用水溶了分装保存备用,但现在比较困惑的是不知道这些酶应该在什么条件下保存比较好,麻烦小伙伴们了解这方面的给个建议,现在我把我实验中的酶列举在下面,知道哪个就帮我回复哪个就好了,不胜感激!
1、β-D-半乳糖苷酶
2、葡萄糖氧化酶
3、过氧化氢酶
4、己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
5、磷酸葡萄糖异构酶
6、α-淀粉酶
7、胃蛋白酶
8、胰液素
9、胆汁
10、溶菌酶
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答非所问

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ET.....

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、至于α葡萄糖氧化酶,过氧化氢酶,这两种酶买来的时候都是冻干过后的粉末,我会根据瓶子上面的u/mg,来分装高浓度的母液若干只,每次要的话拿出一只,就可以了,分装之后的母液要冷冻保藏,但凡是酶,都不要反复的冷冻解冻,这样可能形成冰晶的过程中,破坏酶的,活性区域导致酶的失活
2、胃蛋白酶一般瓶子都比较大,量也很多,我们是买的sigma的,一般都是现配先用,这个比较好称量,对了我们称量的时候一般都会去公共平台使用精确到小数点后面5位数的,梅特勒天平
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
2楼2014-08-30 15:56:14
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天空shm

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-08-30 15:56:14
1、至于α葡萄糖氧化酶,过氧化氢酶,这两种酶买来的时候都是冻干过后的粉末,我会根据瓶子上面的u/mg,来分装高浓度的母液若干只,每次要的话拿出一只,就可以了,分装之后的母液要冷冻保藏,但凡是酶,都不要反复 ...

非常感谢你的回答,但我想问一下,1、你说的分装成高浓度的母液后冷冻保藏这个温度是不是-80℃会更好一下呢还是直接就在-20℃就行。2、还有我买的酶有的是在4℃保存的,那这样的酶配成母液后也应该冷冻保存还是依旧在4℃保存呢3、配成的高浓度的母液这个浓度一般要大于多少?
麻烦您帮我耐心解决一下,我第一次做,而且酶又很贵,很担心弄砸了,拜托拜托
3楼2014-08-31 10:01:35
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答非所问

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
天空shm(sweety代发): 金币+3, 鼓励应助 2014-08-31 14:06:17
sweety: 食品EPI+1 2014-08-31 14:06:36
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天空shm at 2014-08-31 10:01:35
非常感谢你的回答,但我想问一下,1、你说的分装成高浓度的母液后冷冻保藏这个温度是不是-80℃会更好一下呢还是直接就在-20℃就行。2、还有我买的酶有的是在4℃保存的,那这样的酶配成母液后也应该冷冻保存还是依旧 ...

我明白sigma的酶,都不便宜啊,下面我一点一点的给你作答:
1、-20摄氏度就ok
2、你的酶如果买过来的时候就是液体,那么4摄氏度就可以,你的酶如果买过来是固体,那就用缓冲液配好1mg左右的母液,分装到几个小试管中-20摄氏度保存
3、一般1mg左右,具体的要看你需要的浓度是多少(ps:你总不能配完放入你的反应体系之后比文献的还低吧!!)
另外:酶固体粉末(-4摄氏度)一般每年活力消失5%,高浓度液体(-20摄氏度)一年消失10%左右,以供参考
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4楼2014-08-31 10:33:51
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