10楼: Originally posted by kehan777 at 2014-09-01 18:42:11
可以的话，把你的序列复制到这上面来，基因序列和载体的用大小写区分开，或者你自己再画一画图谱再确认一下。
你的框架应该是：信号肽（已含ATG)+个别氨基酸+EcoRI+目的基因+终止密码子+NotI...

11楼: Originally posted by Dearstar at 2014-09-02 08:41:36
恩，你说的完全正确，框架就是这个样子的，其实我想了想前面的AA如果不影响分泌的话，反正最终我还要用酶把目标序列前面几个AA剪切掉的，所以想来想去，决定两个一起做，一边是就这么表达，另外一边是基因敲除掉这 ...

12楼: Originally posted by kehan777 at 2014-09-02 10:36:38
1. 先确认真的是有几个AA，我的只多1个AA，你可以把你序列上的“肽信号肽+个别氨基酸+EcoRI”这一段复制上来核对一下。如果只有1个AA，即三个碱基的话，可以考虑设计引物去除
2. 请问你用什么酶切掉AA？还是说你的 ...