应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙
321/4返回列表1234下一页
查看: 2378  |  回复: 31
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)

[求助] 十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙 已有8人参与

虫子我做DNA电泳接近4年了，从来没失过手，大家可能会想这是一个很简单的实验，怎么会有问题呢？我也是这么想的。所以我师妹出了问题后，我以为很简单就能解决，谁料我亲自上阵，搞了好久问题依旧。真是一世英名毁于这个入门实验手上，晚节不保啊！这不想起了小木虫，特来求助。

言归正传：问题：见图片，不管怎么跑，MARKER都是这个鬼样子，一开始还只有低于500BP的marker出现这样的情况，后面越来越严重，所有的都这样了。

那么问题很简单，我当然不会简单的就来求助，我尝试过哪些解决办法呢？

    一，换电泳Buffer。对师妹不放心，亲自配置新鲜的Buffer，问题依旧。
    二，新买Marker。 这换了Buffer没用，难道Mraker太久了，出问题了？买了俩支新Mraker，一支takara的，一支fermentas的。问题依旧。
    三，新买琼脂糖。 没办法，怀疑琼脂糖有问题，新买了一瓶BIOWEST的琼脂糖。问题依旧。
    四，新买染料。 我们实验室用的是Biotum的gelred，买了大概有大半年了，怀疑染料出了问题，买一支新的。问题依旧。
    五，换电泳仪。 难道电泳仪老化，电压不稳？换另一个一直在跑蛋白偶尔也跑跑中性PAGE的电泳仪（一直正常运行）。问题依旧。
   
神啊，都换得差不多了，还是老样子，这可如何是好？  难道是我加热的姿势不对？微波炉加热和电磁炉加热会有区别吗？明天试试。

十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙
20140825.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-26 20:10:27
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独身行天下

金虫 (小有名气)
会不会是琼脂糖浓度问题？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-26 20:26:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫伊2013

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
阿修罗Axuro(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-28 17:41:28
是不是水被污染了，配BUFFER的水被污染，或者装BUFFER的瓶子被污染了
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-26 20:28:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莫伊2013 at 2014-08-26 20:28:35
是不是水被污染了，配BUFFER的水被污染，或者装BUFFER的瓶子被污染了

我新配Buffer的时候，全是新换的。而且后面又继续新配了几批Buffer，也是一样的问题。
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-26 20:38:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莫伊2013 at 2014-08-26 20:28:35
是不是水被污染了，配BUFFER的水被污染，或者装BUFFER的瓶子被污染了

还有一个现象就是：片段小一些的PCR产物可以跑得很清晰，但是就是Marker有问题，很诡异。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-26 20:41:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 独身行天下 at 2014-08-26 20:26:35
会不会是琼脂糖浓度问题？

琼脂糖浓度不影响电泳的呀。不同的浓度只是分离的DNA的范围不同，我用的是1%的琼脂糖。2%也好 3%也好，只是分离DNA范围不一样，不影响电泳的。我印象中貌似试过一次3%的胶，结果也是一样的。
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-26 20:48:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独身行天下

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 阿修罗Axuro at 2014-08-26 20:38:39
我新配Buffer的时候，全是新换的。而且后面又继续新配了几批Buffer，也是一样的问题。...

loading buffer？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-26 20:49:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 独身行天下 at 2014-08-26 20:49:21
loading buffer？
...

Marker不用加Loading Buffer的，是买来就加了Loading Buffer的。
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-26 20:55:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingsheshidu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
阿修罗Axuro: 金币+5, ★有帮助, 感谢帮助，问题已经解决，另发一贴在分子生物板块。谢谢 2014-08-28 16:16:44
楼主把可能的问题想的已经比较全面了，可问题依旧。最后问到了做胶时的加热方法，这个虽说不是很关键，但是请问楼主你出问题之前用的什么加热？期间换了吗？因为如果加热琼脂糖时瓶子敞口，会导致水分蒸发，加热时间越长蒸发越严重，导致凝胶内缓冲液浓度升高，如果高出电泳缓冲液浓度太多，会影响电泳效果，建议考虑下这个因素。
赞一下 回复此楼
积累知识，抓紧奋斗！
9楼2014-08-26 21:25:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独身行天下

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 阿修罗Axuro at 2014-08-26 20:55:05
Marker不用加Loading Buffer的，是买来就加了Loading Buffer的。...

前面四个样品跑的还行，后面四个样品和maker都出现了拖尾。可能是溶胶不均匀；梳子不干净，上样孔出现问题；

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-26 21:26:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 阿修罗Axuro 的主题更新
321/4返回列表1234下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +11 晴天加油 2026-08-26 12/600 2026-08-28 01:22 by li09465290@
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭