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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
阿修罗Axuro(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-28 17:41:54
同一个问题，当然是同样的答案：

用了多少DNA跑的胶？用量太大了。每孔用100 ng左右就差不多了（取决于你孔的大小）。
我的感觉是严重超量所致，不是其他什么大问题。
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11楼2014-08-26 23:29:32
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莫伊2013

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
阿修罗Axuro(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-28 17:42:10
楼主可以试一下其他实验室的电泳，看是不是同样的结果
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12楼2014-08-27 08:19:32
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-26 23:29:32
同一个问题，当然是同样的答案：

用了多少DNA跑的胶？用量太大了。每孔用100 ng左右就差不多了（取决于你孔的大小）。
我的感觉是严重超量所致，不是其他什么大问题。

麻烦请你认真看问题。看我提的问题是什么。我纠结的不是DNA条带，是MARKER！DNA条带由于是PCR产物，先按习惯加5ul看有没有产物跑的，并不能确定多少，无所谓的！
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13楼2014-08-27 08:59:02
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 莫伊2013 at 2014-08-27 08:19:32
楼主可以试一下其他实验室的电泳，看是不是同样的结果

最麻烦的就是附近没有电泳。这个最难搞。
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14楼2014-08-27 08:59:25
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cx13033236

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问电泳加入的DNA或者maker的浓度是多少，感觉量有些大
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15楼2014-08-27 09:01:44
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 独身行天下 at 2014-08-26 21:26:45
前面四个样品跑的还行，后面四个样品和maker都出现了拖尾。可能是溶胶不均匀；梳子不干净，上样孔出现问题；
...

我没纠结样品！！！！请认真看完我纠结的东西，后四个样只不过是加样过多引起的。我纠结的问题是marker，无论怎么跑，我试过把梳子认真认真再认真洗，都一样的结果。无论是哪一块胶，无论是放胶的哪一个孔，Marker都会这样。
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16楼2014-08-27 09:02:08
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 阿修罗Axuro at 2014-08-26 19:59:02
麻烦请你认真看问题。看我提的问题是什么。我纠结的不是DNA条带，是MARKER！DNA条带由于是PCR产物，先按习惯加5ul看有没有产物跑的，并不能确定多少，无所谓的！...

请教问题火气还这么大。
我也说清楚了，你的marker的问题不是别的，是上样量太多了。
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17楼2014-08-27 09:04:43
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by cx13033236 at 2014-08-27 09:01:44
请问电泳加入的DNA或者maker的浓度是多少，感觉量有些大

麻烦看完我的问题再做回答。marker 5ul
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18楼2014-08-27 09:05:06
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莫伊2013

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
阿修罗Axuro(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-28 17:42:29
引用回帖:
14楼: Originally posted by 阿修罗Axuro at 2014-08-27 08:59:25
最麻烦的就是附近没有电泳。这个最难搞。...

你的拖尾很严重
建议楼主溶胶5次以上 凝胶时间长一些30min以上，楼主电压多少，试没试过跑的时间长一点？
最后，我还是觉得楼主有什么东西污染了
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19楼2014-08-27 09:08:31
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-27 09:04:43
请教问题火气还这么大。
我也说清楚了，你的marker的问题不是别的，是上样量太多了。...

我没有火气大，是看你回答问题如此马虎，marker严重超标会很亮，你看我的marker的亮度就应该知道没有严重超标。marker我按说明书上的5ul
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20楼2014-08-27 09:11:22
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